虽然有了ELISA试剂盒后，是方便了很多。可是不管是植物ELISA试剂盒、小鼠elisa试剂盒还是植物ELISA试剂盒从生产到试验都需要有个良好的环境。只有在zui合适的环境下才能得到zui的效果。以下就做了一个实验：这些捐助者没有被感染，提供捐助，将来的捐赠抗-HCV ELISA呈阴性。
其原因可能是两个顺序采用高阳性预测值，因为这两种检测方法的样品反应有较高的概率是真实的。而不是那些只在一个反应里。ELISA试剂盒即使WHO准则中提到，如果验证性测试不可用，可以使用一个备用的测定，这是作为主要的测定，用于确认样品的状态。
    可得出结论：ELISA试剂盒单一的ELISA试剂盒反应的样品有很高的概率是由负NAT或RIBA显示。样本是由两个不同的ELISA检测抗-HCV体现，植物ELISA试剂盒其他概率是由NAT或RIBA多次反应数据的证实。因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。钩状效应严重时，反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法测定标本中含量可异常增高的物质（例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等）时，应注意可测范围的zui高值。用高亲和力的单抗体制备此类可削弱钩状效应。假使在被测分子的不同位点上含有多个相同的决定簇，例如HBsAg的a决定簇，也可用针对此决定的同一单抗分别包被固相和制备酶结合物。但在HBsAg的检测中应注意亚型问题，HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4个亚型，虽然每种亚型均有相同的a决定簇的反应性，这也是用单抗作夹心法应注意的问题。

    双抗体夹心法测抗原的另一注意点是类风湿因子（RF）的干扰。RF是一种自身抗体，多为IgM型，能和多种动物IgG的Fc段结合。用作双抗体夹心法检测的血清标本中如含有RF，它可充当抗原成份，同时与固相抗体和酶标抗体结合，植物ELISA试剂盒表现出假阳性反应。采用F（ab'）或Fab片段作酶结合物的，由于去除了Fc段，从而消除RF的干扰。双抗体夹心法ELISA是否受RF的影响，已被列为这类的一项考核指标。双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。