因此有些厂家为了保持较好的本底采用了单片段基因工程抗原及合成肽包被，该类试剂盒的流行病学敏感度不够，稳定性也成问题。也有厂家坚持试剂盒高的流行病学敏感度，科学地对待反应结果。动物ELISA试剂盒诊断试剂经历了从合成肽向基因工程抗原的过渡。由于历史的原因，人们往往以反应本底的好坏来衡量ELISA反应试剂盒，基因工程抗原较合成肽抗原有*的*性，就HCV-ELISA试剂盒来讲，*代产品为合成肽抗原，主要是HCV特异性抗原决定簇的肽片段;第二代产品包被的抗原既有基因工程抗原又有合成肽，只是当时的基因工程抗原不全，仅包括了HCV 的核心区片段;第三代产品基本上采用了基因工程抗原，而且这些抗原包括更多、更稳定、纯度更高的HCV 特异性抗原。第三代试剂的敏感度大大提高了。

基因工程抗原与合成肽抗原的区别如下：

? 选择试剂时应选择灵敏度高、特异性好、稳定性好、批间差小、操作方便省时的优良检测试剂，国家参比实验室每年对各厂家的试剂进行质量评估并定期公布评估结果，可作为选择试剂的主要依据。

? 要注意试剂的批号和出厂日期，虽然试剂的有效期多为1年。选择刚出厂的试剂使用。

不同厂家的试剂不能混用。

   不同方法学的检测试剂，会使两对半结果出现一些不同。例如：在实际工作中常用 ELISA检测HBsAg结果为阴性，而电化学发光检测为阳性。除方法学的灵敏度外;动物ELISA试剂盒还存在使用单抗或多克隆抗体试剂的差别。单抗对变异抗原或亚型乙肝标志物检测存在差异，建议试剂厂家对剂的制备应该考虑亚型及型浓度的问题。

3、操作技术的影响

操作过程的控制：

⑴ 严格按照试剂说明书。操作前将试剂在室温下平衡30～60min。

⑵ 加样后及时放人孵箱。标本较多时，要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。

(3)封板温育时，各孔一定要封严，防止阳性标本的液体蒸发，产生周边现象从而导致“花板"的出现。

(4)用洗板机洗板时，保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干：还要防止针口有纤维蛋白或异物，这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板"的出现。

(5)合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。

(6)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

(7)显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。

(8)加样时保持显色剂不外流;A、B液应避免接触金属器械。动物ELISA试剂盒加终止液时应避免产生气泡。

(9)应保证C清洁，整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。以上的措施可以使“花板"降至zui低限度。从而提高检测的特异性。并得到更准确、可靠的实验结果。