因此，双波长比色测定具有能排除由微滴板本身、板孔内标本的非特异吸收、指纹、刮痕、灰尘等对特异显色测定吸光度的影响的长处。比色结果的表达以往通用光密度（oplical density，OD），现按划定用吸光度（absorbence，A），两者含义相同。ELISA检测试剂盒所谓的单波长比色等于通常的以对显色具有zui大吸收的波长如450nm或492nm进行比色测定；而双波长双色则酶标仪在敏感波长如450nm和非敏感波长630nm下各测定一次，敏感波上下的吸光度测定值为样本测定酶反应特异显色的吸光度与板孔上指纹、刮痕、灰尘等脏物所致的吸光度之和；非敏感波长下测定即改变波长至一定值，使得样本测定酶反应特异显色的吸光度值为零，此时测得的吸光度即为脏物的吸光度值。
    以TMB为底物和以OPD为底物的试剂盒均有使用，ELISA检测试剂盒而前者比色波长为450nm，后者为492nm，滤光片需根据要求随时更换。zui后酶标仪给出的数值为敏感波长下的吸光度值与非常感波长下的吸光度值的差。以软板为载体的试验，需先将板置于尺度96孔的座架中，才可进行比色。

    超过一周测定的需低温冰存。如在冰箱中保留过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA 中可使本底加深。保留血清自采集时就应留意无菌操纵，也可加入适当防腐剂。除特殊情况外，在医学检修中均以血清作为检测标本。本文将叙述板式ELISA各个的留意要点，珠式、管式及磁性球ELISA，ELISA检测试剂盒价格均与特殊仪器配合应用，两者均有具体的使用说明，严格遵照划定操纵，必能得出正确的结果。