在动物ELISA试剂盒中的应用有多种形式，可用于间接包被，亦可用于终反应放大。可以在固相上先预包被亲和素，原用吸附法包被固相的抗体或抗原与*结合，通过亲和素－*反应而使*化的抗体或抗在相化。这种包被法不仅可增加吸附的抗体或抗原量，而且使其结合点充分暴露。另外，在常规ELISA中的酶标抗体也可用*化的抗体替代，然后连接亲和素－酶结合物，以放大反应信号。

    ELISA试剂盒普遍用作非放射性同位素的成键化验. 动物ELISA试剂盒在这种方法中, 通常标准配体是固定的, 通过加入溶液相受体或蛋白质来使之成键. 通过加入与受体特异性反应的抗体来定量成键的受体, 而且zui初抗体的量以加入第二种能显色的抗体测量. 第二种抗体能识别抗体的末端, 在其末端的碱性磷酸酯或过氧化物酶等与酶发生反应, 可由蛋清中提取。分子量60kD，每个分子由4个亚基组成，可以和4个*分子亲密结合。现在使用更多的是从链霉菌中提取的链霉和(strepavidin)。

     *(biotin)又称维生素H，分子量244.31，存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物，*－羟基琥珀亚胺酯(biotin-hydroxysuccinimide，HS)可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子形成*化的产物。亲和素与*的结合，虽不属免疫反应，动物ELISA试剂盒但特异性强，亲和力大，两者一经结合就极为稳定。由于1个亲和素分子有4个*分子的结合位置，可以连接更多的，形成一种类似晶格的复合体。因此把亲和素和*与ELIS偶联起来，就可大提高动物ELISA试剂盒的敏感度。