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大肠杆菌显色培养基配方

阅读:315发布时间:2015-03-18

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大肠杆菌显色培养基
E.Coli Chromogenic Medium
用途:用于快速、准确检测大肠杆菌大肠杆菌培养24小时,大肠杆菌显蓝绿色
大肠杆菌显色培养基是公司改良的培养基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大肠杆菌的快速检测。大肠杆菌显蓝绿色,大肠菌群显无色,其它菌显黄色或无色,革兰氏阳性菌被抑制。
成份 (g/L)
特殊营养物质    37.9
显色剂    0.2
琼脂    12
pH 6.8 ± 0.2 25 ℃
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得*的结果。
注意 
此培养基仅供实验室使用。
用法
称取本品 50.1g 加入 1000ml 蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸不要超过 1 分钟。分装三角瓶, 121 ℃ 高压灭菌 15 分钟。取 1ml 制备好的样品液加入直径为 9cm 无菌平皿中心,倾入冷却至 45 -50 ℃ 培养基约15ml ,混匀,凝固后, 36 ± 1 ℃ 倒置培养 18 ~ 24h 。或冷却至 45-50 ℃时,倾入无菌平皿,琼脂*凝固后,在 37 ℃的培养箱中倒置放置 1-2 小时,加入适当稀释度的样品液 1ml ,涂布于培养基上, 36 ± 1 ℃培养 18 ~ 24h 。 
贮存 
制备好的平板应立即使用,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃,注意避光保存。 
失效 
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
操作步骤 
1 、按国家标准、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液 
2 、取样品液 1ml 加入 冷却至 45-50 ℃显色培养基中混匀或 涂布于平板上 
3 、 36 ± 1 ℃ 培养 18 ~ 24h ,选用有 30 ~ 200 个菌落的平板,计数平板上出现的典型大肠杆菌菌落。大肠杆菌典型菌落为蓝绿色,其它细菌为无色或黄色菌落。 
总大肠杆菌 = 蓝绿色菌落 
4 、对可疑大肠杆菌菌落可划线接种到营养琼脂平板上, 36 ± 1 ℃培养 12-16 小时,挑取单菌落做大肠杆菌全套生化试验 ( 本公司有生化鉴定管套装 20 支 x3 种 ) 
质量控制 
1 、外观 
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈乳白色。制备好的平板呈透明无色固体培养基。 
2 、微生物试验 
在 36 ± 1 ℃ 培养 18 ~ 24h 小时:
质控菌株    ATCC    生长情况    菌落颜色
单增李氏菌    27853    -/+    无色
*    25923    -/+    无色
大肠杆菌    25922    +++    蓝色
沙门氏菌        +++    无色
大肠菌群        +++    无色
方法的局限性 
该显色培养基鉴定大肠杆菌 ,少数情况下可能会出现假阳性,但不会出现假阴性,有时可能需做其它补充试验。
典型特征 
大肠杆菌典型菌落为蓝绿色,大肠菌群为无色菌落,其它细菌为无色或黄色菌落。


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