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红细胞裂解液说明书

阅读:462发布时间:2015-06-08

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猪外周血淋巴细胞分离液
说明:适用于从血液中分离所需细胞。
红细胞裂解液说明书密度:1.1100±0.0001g/ml
储存条件:15-25℃避光保存,启封后置4℃保存。


红细胞裂解液
保存:2-8℃保存,保质期2年。常温运输。
产品简介:
本产品是利用细胞内外存在盐离子浓度差而导致细胞膜胀裂的原理来分解无核红细胞的。
本产品经无菌处理,主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化,淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。
红细胞裂解液说明书使用说明: 
1.1倍体积的新鲜全血,加入3倍体积的红细胞裂解液。如1ml新鲜全血加入3ml红细胞裂解液,轻轻涡旋或颠倒混匀。
2.冰上放置15分钟,其间轻轻涡旋混匀两次,红细胞裂解后,溶液应该是清亮透明的。
3.收集细胞:4℃,450×g离心10分钟以沉淀白细胞,小心吸弃上清液。
4.向白细胞沉淀中加入两倍体积的红细胞裂解液,轻轻涡旋充分重悬白细胞。如起始血液为1ml,则加入2ml的红细胞裂解液。
5.4℃,450×g离心10分钟沉淀白细胞,小心并*吸去上清液。
6.重悬细胞,用于后续实验;如提取RNA,于此步开始使用DEPC水配制的溶液进行操作。(组织细胞处理:新鲜组织经*或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液,离心弃去上清液,其余同上。)
注意事项:
样品要求新鲜,建议血液等现采现做;在第二次裂解的时候,一定要将细胞充分悬起混匀,只要细胞分散充分,一般情况下都会裂解比较*。个别情况:如果样品中含有有核红细胞,则裂解不*。例如鸟或禽类的红细胞。


*(阿氏液)
阿氏液
阿氏液。
配制方法
阿氏液配方如下:
葡萄糖 2.05克
柠檬酸钠 0.8克
柠檬酸 0.055克
氯化钠 0.42克
红细胞裂解液说明书加蒸馏水至100毫升,加热溶解后将pH值调到6.1,经过69千帕,15分钟的高压灭菌,放置在4℃的环境内,保存备用。
用途
阿氏液主要用于保存红细胞,在4℃的环境下,红细胞可以保存2周而不改变活性和特性。因此阿氏液用于采血、保存和运送红细胞进行化验。


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