上海酶联生物研究所

影响胎牛血清质量的几大因素

时间:2019-6-11阅读:248
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市场上的胎牛血清品种繁多,鱼龙混杂,许多科研工作者,特别是刚接触细胞培育的人,难以分辨血清质量的优劣。本人根据十多年来血清出产出售的经验,总结如下:
 
一、外观
1、色彩
根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或赤色,我国的细胞培育用血清规范是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的凹凸对血清并无直接影响,这个目标的含义在于能体现出采血进程的谨慎规范程度,良好的操作能下降血清的溶血。国产血清的采血点很分散,大多是由屠户采血后立刻离心搜集,所以很少会有溶血,表现出明亮的蜡黄色,当然,国产血清也很少有规范含义上的胎牛血清。进口胎牛血清或多或少总有点溶血,因为真实的胎牛血清凝血功能差,红细胞简单破裂。
 
总的来说,国产的血清呈现出蜡黄。进口的血清,质量的呈现出谈黄、微赤色,如Gibco 16000,差点的呈现出橘赤色或鲜赤色。当然,热灭活血清或保存不当的血清,因为血红蛋白的损坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。
 
2、沉积
许多血清客户,会发现进口血清有沉积,然后置疑血清的质量问题,这是没有根据的。血清中的沉积是由纤维蛋白的凝集发生,对血清质量没有任何影响,沉积的发生原因许多,和厂家的加工出产方式密切相关。国产的血清,大多来自北方,因为价格低廉,保存环境都不好,从采血、冷冻、运输到出产会经过屡次冻融,每次冻融进程,就会分出部分纤维蛋白沉积,这样,血清制品过滤后看起来反而愈加的“干净”,很少有沉积发生。
 
进口的胎牛血清,过滤分装前很少会反复冻融,出产后的制品也是明澈的,但随着时间的推移,血清中的大量纤维蛋白会分出形成沉积。当然,进口的重生牛血清,一般牛龄都在2周左右,血清中的各种蛋白含量显着偏高,出产后血清可能会污浊,甚至有大量沉积。
 

3、弄清度
进口胎牛血清因为蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡,而国产血清,因为绝大多数是重生牛血清,相对而言愈加粘稠,色彩略深,这对于开始接触血清的人很难判别,但把两者进行比照,可简单分辨。
 
二、首要技术目标
现在国内血清的质量规范是2005版的《中华人民共和国药典》,首要目标有以下几点:
 
1、内毒素
规范为不高于5EU/ml。内毒素是细菌破碎后细胞壁的成分,因此内毒素含量的凹凸可表现出采血到出产一系列进程中的无菌操作状况。现在,国产血清根本都能到达这一要求,许多进口胎牛血清内毒素含量反而更高,如Gibco 26140,只要求不高于50EU/ml,高出我国规范10倍,即使是16000,也要10EU/ml,血清质量也未见影响。可见,内毒素含量偏高不影响质量,除非含量*,预示着现已污染。
 
2、总蛋白含量
胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,阐明采血的牛龄偏大,不是胎牛,数值偏低,标明血清可能掺水了。
 
3、血红蛋白
规范为不高于20mg/dl,色彩越红,数值越高,反之,数值越低。
 
4、pH
国产血清,大多高于7.5,进口胎牛血清,大多低于7.5,具体原因不知道,可能和牛龄有关,这也能用来开始鉴别血清的来历。
 
5、微生物
包含细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原性等。随着国内血清厂家出产条件的改进提高,细菌、霉菌等“大型”微生物简直能100%操控,支原体经过0.1um过滤,大多也能铲除。大肠杆菌噬菌体的污染仍是比较严峻的,首要是出产环境进程中带入,又无法过滤,很难*铲除,但对血清质量影响不大。特别是BVDV,在国产血清中简直90%以上都存在,这类微生物是影响国产血清质量的重要因素之一,而进口胎牛血清中根本都操控的很好。
 
6、免疫球蛋白
国产血清的只是定性检测,结果也很不准确,进口胎牛血清大多定量检测。免疫球蛋白的数值能*体现出采血的时的牛龄状况,国产血清,根本都是重生牛的,血清中简单发生IgM,IgG的含量也偏高,进口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也较低。
 
7、其它
不管是国产仍是进口血清,都是不测抗生素的(无四环素胎牛血铲在外)。国外,抗生素的运用很严厉,用量也很少,每头奶牛的产品包含血清都能够溯源的,因此能够做到胎牛血清中不含抗生素或含量极低;国内,抗生素的乱用已成了普遍现象,血清中残留很高,对细胞培育极为晦气,这是国产血清质量差的根本原因。
 
三、血源
 
市场上的血清血源首要分为我国、北美、南美和澳洲。
 
1、国产血清质量差,这是*的,首要原因并不是出产厂家的职责,而是天然环境差和抗生素的大量运用。国内环境污染严峻,一起养殖进程中抗生素极其乱用,有毒有害物质会大量残留在血清中,zui终晦气于细胞的成长。
 
2、南美血清,来历许多,如Bioind的巴拿马、Gibco的乌拉圭、巴西等,这些血清因为采血的不可控性,质量参差不齐,当然,相对于国内血清来说好的多。另外,国内出售的南美血清大多色彩鲜红,如Bioind、Gibco、Hylone等品牌,但阿根廷的血清例外,这可能和各国的采血、出产工艺有关。
 
3、北美血清,首要来自美国和加拿大,如Hclone的SH30396、SH30070、SH30071、Gibco的16000-044、26140-079等。这类血清,等级越高的色彩越淡,表现为淡黄中带一点微红,SH30070和SH30396比照就很显着,特级胎牛血清根本就能进行干细胞培育。北美血清还有一个显著特点就是每瓶血清都能溯源,这对一些大型的疫苗厂、药厂尤为重要。
 
4、澳洲血清,来历首要是新西兰和澳大利亚,这是在北美血清禁运之后进入我国市场的,一般不具有溯源功能,因为出产、运输等原因,价格相对来说比较贵。拿Gibco的10099和16000相比较,后者质量等级更高,色彩更淡,性价比更高。

 

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