当前位置:上海酶联生物研究所>>技术文章>>上海酶联:应该如何进步ELISA的重现性?
免疫检测法的性表现为单次试验孔间(批内)的重复性和屡次试验之间(批间)的重复性。CV值高则表明度低,一般由以下两个原因形成:移液技能和洗刷技能。
一:移液技能
1. 移液时,枪头应对准孔*,防止接触孔壁及底部。
2. 移液后悄悄晃动混匀试剂。
3. 假如您的样品具有黏性,请预先润洗枪头以消除表面张力的影响。吸液时等候片刻使体积平衡后再取出。
4. 移液不充分或移液体积不均,阐明移液器需求校对。必要时请查看移液器并重新校对。
5. 加样时,不同的试剂标准品和样本间都要保证更换枪头,防止穿插污染。
6. 保证运用合适的枪头。不合适的枪头无法正确量取吸液和加样的体积。
二:洗刷技能
1. 假如运用自动洗板机或多通道移液器,请保证进出口能正常运作。
2. zui后一次洗刷后,翻转酶标板倒出剩余的洗刷液,并在吸水纸上拍干液体。洗板太快或太慢都会降低度。不能让孔内液体天然风干,需当即进行下一步操作。
3. 依照阐明书,增加足量的洗刷液至孔内,并保证洗刷*。
4. 因为洗刷液不是通用的,当试剂盒内的洗刷液用完时,请不要运用其他试剂盒中的洗刷液。如有需求,可联络技能支持寻求帮助。
5. 不要减少洗刷时的浸泡时间或跳过浸泡的步骤。
6. 依照阐明书上引荐的洗刷次数清洗,随意改动洗刷次数会影响试验的准确性。
三:贮液瓶
1. 为防止污染,不同的试剂运用不同的贮液瓶。一些试剂或样本很容易被污染(比如唾液、氧化剂等),请参阅阐明书操作。必要时候采取一些预防措施维护溶液。
四:封板覆膜
1. 运用过的封板覆膜可能含有上一步试验残留的试剂,假如重复运用会形成孔板污染。建议每一次孵育运用新的封板覆膜。
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