上海酶联生物研究所

我司剖析 :关于抗原修正办法

时间:2020-4-30阅读:614
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至今停止,抗原修正有许多种办法,在这些办法中,有的是依据抗体的要求来进行,有的是依据抗原的表达程度来进行,我们则对每种病例每项检测,都要求有必要进行抗原修正,以到达抗原全面表达的*佳状态。
 

1.  真空负压抗原修正法:
 

① 切片脱蜡至水。
 

②0.3%H2O2甲醇真空负压处理5分钟。
 

③自来水洗,蒸馏水洗。
 

④0.01M柠檬酸盐缓冲液(PH6.0),真空负压干燥箱预先调至95 ℃,真空负压处理10分钟。
 

⑤待修正注降至室温的一,PBS洗3次,随后按选好的免疫组化染色办法进行染色。
 

2.  微波辐射抗原修正法:
 

①切片脱蜡至水。
 

②0.3%H2O2甲醇处理10分钟。
 

③自来水洗,蒸馏水洗。
 

④ 0.01 M柠檬酸盐缓冲液(PH6.0),于微波炉内微波辐射10分钟,如检测Er和Pr则需求20辐射分钟左右。
 

⑤待修正液降至室温后,PBS洗3次,随后按选好的免疫组织化学的染色办法进行染色。
 

3.  高压抗原修正法:
 

①切片脱蜡至水。
 

②0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。
 

③自来水洗,蒸馏水洗。
 

④切片放入抗原修正液中,边同容器放入高压锅中加热至沸腾。盖上压力阀至喷汽后继续1-4分钟。
 

⑤待修正液康复至室温后,PBS洗3次,随后按选好的免疫组织化学染色办法进行染色。
 

4.  隔水热抗原修正法:
 

①切片脱蜡至水。
 

②0.3%H2O2甲醇处理切片10分钟。
 

③自来水洗,蒸馏水洗。
 

④切片放入0.01 M柠檬酸盐缓冲液(PH0.6)中,边同容器一起放入水溶锅中加热,其间应不断用温度计测其温度,待抗原修正液的温度到达有用温度后(92 ℃)。即开始计时,继续40分钟。

 
⑤待抗原修正液康复至室温后,PBS洗3次,随后按选定好的免疫组化染色办法进行染色。
 

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