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人慢性髓系白血病细胞 (K562)

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更新时间:2017-07-26 22:00:55浏览次数:184次

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人慢性髓系白血病细胞 (K562)细胞介绍:
该细胞是由Lozzio从一名53岁的慢性髓细胞性白血病急变期的女性患者的胸水中分离建立的。该细胞曾被认为来源于粒系,处于高度未分化阶段;Anderson 等人作了细胞膜特性的研究后,认为该细胞是红白血病细胞系。该细胞是对自然 杀伤细胞高度敏感的体外靶标,故而被广泛应用于这方面的研究。K562的原始 细胞是一种具有多向分化潜能的造血系统的恶性肿瘤细胞,能自发分化为红系、粒系和单核系的可辨识的祖细胞。该细胞表达CD7(25 % )。
细胞特性:
1)来源:骨髓
2)形态:淋巴母细胞样;圆形,悬浮生长
3)含量:>lxl06 个/mL
4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格:T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存:使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后,可在1000RPM,常温条件下,离心5min后,于洁净操作台弃去上清,加入*使用的培养基后转移至l〇cm培养皿或者T25培养瓶中培养,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。


人慢性髓系白血病细胞 (K562)细胞培养步骤:
1)培养基及培养冻存条件准备:
1.准备 RPIVM-1640培养基(RPIVM-1640:GIBCO,货号 31800022,添加 NaHC031.5g八, D-葡萄糖2.5g八,丙酮酸钠O.llg八),90%;优质胎牛血清,10%。
2.培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
2)细胞处理:
复苏细胞:将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将 细胞悬液加入l〇cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


人慢性髓系白血病细胞 (K562)对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加l-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。


注意事项:
收到细胞后,若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们。
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
人慢性髓系白血病细胞 (K562)细胞用途:仅供科研使用。
 

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