特异性细胞免疫是由T细胞介导的，因此，细胞免疫检测通常是检查T细胞的数量、功能及其产物如细胞因子等，是了解机体细胞免疫状态的重要手段。
一、淋巴细胞的分离
细胞免疫检测首先要从人或动物血液及组织中分离出活的淋巴细胞。分离淋巴细胞的方法有多种，目前常用Ficoll密度梯度离心法直接分离外周血单个核细胞。
分离人外周血单个核细胞（PBMC）的分层液是比重1.077±0.001的聚蔗糖(Ficoll)-*(Urografin)(F/H)分层液。红细胞、粒细胞比重大，离心后沉于管底；淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重，离心后漂浮于分层液的液面上，也可有少部分细胞悬浮在分层液中。吸取分层液液面的细胞，就可从外周血中分离到单个核细胞。
【材料】肝素抗凝人血、淋巴细胞分层液、无Ca2+ 、Mg2+ hanks液、离心管、试管、吸管、毛细管、*。
【方法】
（1）采取新鲜静脉血2ml，加入含0.1ml肝素（50单位）的试管中，加2mlhanks液混匀。
（2）用滴管将稀释过的血液沿管壁缓慢加入2ml细胞分层液的液面上（分层液与稀释血液体积比例为1：2），注意两者不能混合，保持界面清楚，用水平离心机以2000转/分，离心20分钟，离心完，可见红细胞沉降至zui下层，上层为血浆，中层为分层液，血浆与分层液的界面有一比较清楚的乳白色淋巴细胞和单核细胞层细胞免疫检测技术（见图4-1）。用毛细滴管吸取该层，置含有1滴肝素及5倍以上体积无Ca2+ 、Mg2+ Hanks液的试管中，以2000转/分离心10分钟，弃上清液后，以同样试液再洗涤一次。
（3）尽量吸去上清液，将沉于管底的细胞沉积块摇散，加Hanks液至1ml作细胞计数，用Hanks液配成2×106细胞/ml的细胞悬液。
二、E花环形成试验（erythrocytc rosette forming test）
人类T淋巴细胞表面CD2分子是绵羊红细胞（SRBC）受体，也称E受体，在一定条件下，SRBC环绕T细胞与之结合，形成花环状，称E花环（E-rosette），形成此种花环的细胞称E花环形成细胞（简称E-RFC）。
E花环试验可用作人外周T细胞的分离与鉴定。
【材料】淋巴细胞悬液、1%SRBC悬液、灭活之小牛血清、离心管、试管、吸管、载玻片、0.8%戊二醛、瑞氏染液。
【方法】
（1）取上述配好之淋巴细胞悬液0.1ml于洁净小试管中，加入1%SRBC悬液0.1ml。再加入小牛血清0.1ml，混匀，置37℃水浴箱中5分钟，500转/分，离心5分钟，放4℃冰箱2-24小时。
（2）从冰箱中取出试管，留适量上清液，轻轻摇匀，加0.8%戊二醛2滴，轻摇后，置4℃冰箱15分钟，取出，作成涂片，待自然干燥，以瑞氏染液染色。
（3）计数：镜下观察，凡结合三个以上SRBC的T细胞即为E-RFC，计数200个淋巴细胞，求出E-RFC占淋巴细胞总数的百分率。
【结果】
一般认为E-RFC的正常值在60％以上，如少于50％则为低下。如欲分离T细胞，可用密度梯度离心，E-RFC因比重增大而沉于管底，与其他细胞分离；用低渗法裂解花结中的SRBC，即可获得纯化的T细胞。
三、淋巴细胞转化试验（微量全血法 ）
T细胞在体外培养时，当受到非特异性的有丝分裂原（PHA）刺激后可转化为淋巴母细胞，并进行有丝分裂，转化的淋巴母细胞，在形态上出现了幼稚化，光镜下很容易识别，可通过淋巴细胞转化率反映机体T细胞免疫功能。此试验也可用3H-TdR掺入法或MTT法定量检测。
