实验材料 细菌
试剂、试剂盒 胰化蛋白胨酵母提取物氯化钠NaOH
仪器、耗材 培养瓶玻璃棒离心管摇床
实验步骤
1. 在3个无菌培养试管中各加人5 ml LB培养液，并标上序号1、2、3。
2. 吸取5 μl 细菌培养液加入1号试管中振荡揺匀。
3. 接着从1号试管吸5 μl 稀释液加入 2号试管振荡摇匀。
4. 从2号试管吸5 μl 稀释液加入3号试管振荡摇匀，每次都使用新的吸头。
5. 从每个试管中分别取100 μl 菌液涂布于LB平皿上，并且做好记号，待平板干后于 37℃培养。
6. 计算每亳升细菌细胞数：细菌细咆数/ml=10×菌落数×稀释倍数。
7. 包裹好平板保存于4℃以备进一步实验用。
实验材料 细菌
仪器、耗材 接种环培养皿
实验步骤
一、实验准备
1. 接种环
（1）灭菌，将接种环置于本生灯火焰中灼烧直至变红。
（2）冷却，将接种环触碰无菌琼脂平板的表面直至其不发出咝咝声。
二、实验步骤
1. 采用无菌操作技术，用接种环将接种物从平板的一侧开始划线。
2. 重新消毒接种环，从*划线处将样品划线至平板的其佘部分，重复划线直至覆盖整个平板。
3. 于37℃培养直至长出单菌落。
4. 如果要从很多的菌液中分离单克隆，可以将平 板分为4、6或8小份，在每个小份中划出单克隆。
实验材料 细菌
仪器、耗材 涂布棒培养箱培养皿
实验步骤
一、实验准备
1. 涂布棒
（1）加热并弯曲一支直径4 mm 的玻璃管或巴斯德吸管制备涂布棒。
（2）灭菌，将涂布棒的三角部分浸没于酒精中，从容器中取出后再通过灯焰，点燃其上的乙醇。
（3）待涂布棒上的火焰熄灭后，将其触碰无菌琼脂平板的表面使其冷却。
二、实验步骤
1. 吸取0.05~1 ml 培养物至一只干的平板上。
2. 用涂布棒作圆周运动将培养液涂布均匀，或用涂布棒的边缘在平板的表面划光栅图案 （一系列平行线）然后转动平板并与已涂布的平行线成直角重复涂布。
3. 平板盖微开至平板*晾干，于37℃培养。
