过培养法
实验方法原理
实验材料 细菌
试剂、试剂盒 胰化蛋白胨酵母提取物氯化钠NaOH
仪器、耗材 接种针培养瓶摇床
实验步骤
1. 取5 ml 液体培养基加入一支无菌的16 mm 或18 mm 的培养试管中。
2. 用接种环挑一个单菌落，浸没于培养液中并轻轻振动接种环，使待接种的细菌分散在培养液中。
3. 盖好试管，在摇床或转鼓式培养装置上以60 r/min 速度。
4. 于37 ℃培养至饱和（约6 h）新鲜培养至饱和期的培养液细菌浓度大约为1X109~2X109细胞/ml。
大体积培养法
实验材料 细菌
试剂、试剂盒 胰化蛋白胨酵母提取物氯化钠NaOH
仪器、耗材 接种针培养瓶摇床
实验步骤
1. 按1：100的比例将过培养物加入到一个无菌烧瓶中，烧瓶的体积应该是培养液体积的5倍以上。
2. 于37℃，约300 r/min 剧烈揺动培养。
注意事项
1. 如果不揺动培养细胞，所用烧瓶的体积应比培养液体积大20倍以上。
细菌培养的检测
实验材料 细菌
仪器、耗材 显微镜玻片盖玻片滴管
实验步骤
一、利用计数板检测
1. 用一片干净的盖玻片盖住一片干净的计数玻片或者petraff-Hausser小室，参见下面。
2. 用含少量培养液的吸管接触盖玻片的边缘。
3. 在相差显微镜400倍下观察，并且按一个小方块中所见的每个细菌大约相当于2×107细胞/ml，计算浓度。
二、利用分光光度计检测
1. 稀释培养液至OD600＜1。
2. 按每0.1OD值大约相当于108细胞/ml计算细菌浓度。
