小鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ）Elisa测定试剂盒样本要求
在收集标本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测，对收集后当天就进行检测的标本，及时储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，请造模取材后，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差，蛋白极易降解，直接影响实验质量，所以避免反复冻融。代测放免标本的客户取材前须向我司销售人员索要说明书，具体操作注意事项请与我司技术人员沟通。
液体类标本：标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。
血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
血浆：应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入10%（v/v）抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1%heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
尿液、胸腹水、脑脊液：用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.0-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin（*）。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清置于-20度或-70度保存，如有必要，可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
三、寄标本时需注明以下情况：
1、标本编号；2、所测项目；3、是否做复孔；3、；4、实验后标本是否寄回。
客户须知：
客户应对所提供的材料及信息负责，如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。
Pharmacokinetics of ginsenoside Re in rat
Abstract:Objective To develop a HPLC method for the determination of ginsenoside Re concentrations in rat plasma samples and to research pharmacokinetics of the concentration-time parameter of ginsenoside Re in rats after iv. Methods The pharmacokinetic characteristics were calculated after iv of 20, 30 and 40 mg·kg^- 1 ginsenoside Re in rats. Results The main parameters t 1/2（α） were 6. 505, 6. 817 and 4. 499 min respectively, t 1/2（α） were 28.96, 30.49 and 27.57 min respectively, The AUC were 599.31, 1025.65, 1415.7 mg·L^-1, min respectively, the main parameters are similar. Conclusions The result that the AUC values are directly relative to the doses indicates that the elimination of ginsenoside Re is linear pharmacokinetics.[著者文摘]
小鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ）Elisa测定试剂盒是人参皂苷的一类主要有效成分，质量分数约占总 皂苷的30％。人参皂苷Re具有较强的抗缺血性 心律失常作用n ；起到自由基陷阱作用，可以保护 所有的未饱和脂肪酸，阻止其被氧化，有显著的抗 衰老功能 ；XCd’鼠的体液免疫和细胞免疫均有刺 激作用，增强免疫功能。此外人参皂苷Re还具有 较强的镇静作用及抗利尿作用，对东莨菪碱造成的 小鼠功能性损伤具有很好的修复作用L3 J。另据文 献[4]报道，人参皂苷Re还是人参皂苷中降低醋酸 *不良反应的主要成分，同时具有刺激蛋白酶 的分泌【5J，增强药物的透皮吸收的功能 6。
目前国内外对人参皂苷的研究侧重于植物化 学和药理学。近二十年来，虽对人参皂苷Rgl和 Rbl的药动学研究可见报道【7-9 J，但对人参皂苷 Re的药物动力学研究尚未见文献报道。
1 仪器与材料
Perkin Elmer型高效液相色谱仪(1022泵，Spectra Focus检测器，美国PE公司)，YKH型液 体快速混合器(江西科研厂)，SLJ—II型电动 离心机(沈阳市理化仪器厂)，SCQ一50型超声波 清洗机(上海申波超声公司)，电热恒温水浴锅(江 苏省东台市电器厂)。
人参皂苷Re、*(HPLC面积归一化法测 定纯度质量分数分别为99．5％、99．1％，自制，沈 阳药科大学天然药化教研室提供)，无水乙醇(分 析纯，山东禹王化学试剂厂)，磷酸、正丁醇(分析 纯，天津化学试剂厂)，甲醇、乙腈(色谱纯，山东禹 王化学试剂厂)，水为重蒸馏水。
Wistar大鼠，体质量200～260 g，雌雄兼用， 沈阳药科大学实验动物中心提供，合格证号： SCXK(辽)2003-008。
2 方法与结果
2．1 色谱条件选择
色谱柱：HYPERSIL ODS(10肛m，200 mm× 4．6 mm，)，流动相：乙腈一甲醇一水一磷酸 (体积比为18．40：27．50：54．10：0．05)，流速： 0．8 mL·min～，检测波长：207 nm，柱温：20℃ ， 进样量：20 L。
2．2 标准溶液及内标溶液的配制
精密称取人参皂苷Re适量，用无水甲醇溶 解配制成1 mg·I -1的标准储备液，稀释标准储备 液得100 mg·L 标准工作液。内标物*用无水甲醇溶解配成100 mg·L-1内标储备液，稀释 内标储备液得20 mg·L-1的内标工作液，置冰箱 中冷冻保存。
2．3 给药方法
对大鼠实施颈静脉持久性插管术[ 】，术后大 鼠单笼饲养，72 h后供实验使用，在每次取血的 间隔内将导管内充满100 mg·L-1肝素生理盐水 以防血凝。大鼠实验前禁食12 h交叉静注20、 30、40 mg·kg-1不同剂量的人参皂苷Re注射液， 交叉实验的实验间隔为72 h。于给药前和给药后 5、10、20、30、45、60、90、120 min各取血250 L置 于涂有肝素的塑料离心管中，离心(3 000 r·min-1) 5 rain，取血浆100肚L，置于冰柜(一18℃)中保存待测。
2．4 血浆样品的处理
精密吸取血浆样品100 L置5．0 mL具塞 离心试管中，加入2 mI 正丁醇和20 L内标工 作液，置液体快速混合器上振荡5 min。离心 (5 000 r·min-1)10 min，移取上清液，氮气吹干， 用流动相溶解。离心(10 000 r·min-1)10 min，取 上清液进样20肚L。
2．5 专属性考察
按“2．4”条方法操作。实验条件下，血浆中杂 质不干扰样品及内标物的测定，人参皂苷Re及 内标物*的保留时间分别为15 min和 17 min，色谱图见图2。
A- Blank plasma；B- Blank plasma with gensingnoside Re；C- Blank plasma with puerarin；D---Plasma sample with puer— arin：1- gensingnoside Re；2一Puerarin
Fig．2 HPLC chromatograms of gensingnoside Re and internal standard(puerarin)in rat plasma
2．6 标准曲线的制备
分别于一系列试管中加入人参皂苷Re及空白大鼠血浆100肚L，使各管浓度分别为1、5、15、30、45、75、100 mg·L～，按“2．4”条操作，重复操作5次，以人参皂苷Re与内标物峰面积的比值(Ai／As)为纵坐标，人参皂苷Re的质量浓度为横坐标绘制标准曲线，计算回归方程及相关系数。本方法在1～100 mg·L-1内线性关系良好，回归方程为R=0．039 9p一0．024 4，r=0．999 2。其中R为人参皂苷Re与内标物lD峰面积的比值，l为人参皂苷Re的质量浓度。
2．7 精密度与准确度
取空白大鼠血浆100 L，按“2．6”条方法配制低、中、高3个质量浓度(分别为5、30、100 mg·L-1)的人参皂苷Re样品，进行6个样品分析，连续测定3 d，用当日标准曲线计算人参皂苷Re样品的质量浓度，从而考察方法的精密度与准确度，结果见表1。
Table I Accuracy and precision of the HPLC assay gensingnoside Re in the rat plasma(Jl 6)
2．8 血药质量浓度测定
样品测定时随行标准曲线，把待测物与内标 物的峰面积之比代入当天的标准曲线，计算出未 知样品的质量浓度，以人参皂苷Re样品是否合 格决定该样品测定结果的取舍。
2．9 大鼠静脉注射不同剂量(20、30、40 mg·kg-1 的人参皂苷Re的药物动力学参数和平均血药质 量浓度一时间曲线
大鼠静注3种不同剂量的人参皂苷Re注射 液，平均血药质量浓度一时间曲线见图3。
将低、中、高3个剂量组的血药质量浓度一时 间数据用3P87药物动力学程序处理后，得三者 的药物动力学参数，结果见表2。结果表明，大鼠 静注低、中、高3个剂量组的人参皂苷Re后，3组 的药物动力学特点成双隔室模型。3种不同剂量 的tl／2(口)、V(c)、C1等主要动力学参数十分相近， 经统计学t检验无显著性差异(P>0．05)，且AUC随剂量增加而成比例增加，说明在此剂量范 围内人参皂苷Re的消除为线性动力学。
3 讨论
大鼠经静脉注射给药人参皂苷Re 40 mg·kg-1后，药时曲线符合二室开放模型 tl／2( )为4．499 min，提示人参皂苷Re自*室向周边室分布迅速，tI12(f1)为27．57 min，提示人 参皂苷Re在体内消除迅速，表观分布容积Vc为 0．33 L·kg～，约为大鼠平均血容量l5倍，提示该 药分布广泛。
由于小鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ）Elisa测定试剂盒检测波长为207 nm，干扰 因素较多，又因其在正丁醇中的溶解度zui大，考查 了分别用1．0、1．5、2．0、2．5 mL正丁醇萃取和分 别用1．0、2．0 mL甲醇沉淀的方法提取血浆中的 样品，在50～60℃水浴中用氮气吹干，用流动相 溶解。离心(10 000 r·rainI1)10 rain，取上清液进 样20肛L。比较HPI C图谱，以分离效果、杂质含 量及提取率为综合指标，确定采用2．0 mL正丁 醇萃取的方法进行血浆样品处理，效果较好。
人超敏生长激素(US-GH）Elisa检测试剂盒 Human Ultra Sensitive growth hormone,U S-GH ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人超敏前列腺特异性抗原(PSA-US）Elisa检测试剂盒 Human Ultra Sensitive Prostate Specific Antigen,PSA U S ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人*/苯丙酸去*(NP）Elisa检测试剂盒 Human Nandrolone Phenylpropionate,NP ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人16α羟基雌酮1(16-αOHE-1）Elisa检测试剂盒 Human 16-αHydroxyestrogen 1,16-α OHE-1 ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人*(HYD）Elisa检测试剂盒 Human Hydrocortisone,HYD ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人糖皮质激素受体β(GR-β）Elisa检测试剂盒 Human glucocorticoid receptor-β,GR-β ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人糖皮质激素受体α(GR-α）Elisa检测试剂盒 Human glucocorticoid receptor-α,GR-α ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人高敏三碘甲状腺原氨酸(u-T3）Elisa检测试剂盒 Human Ultrasensitivity Tri-iodothyronine,u-T3 ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人黄体生成素释放激素(LHRH）Elisa检测试剂盒 Human Luteinizing Hormone-Releasing Hormone,LHRH ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人8异前列腺素(8-iso-PG）Elisa检测试剂盒 Human 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人肾素(Renin）Elisa检测试剂盒 Human Renin ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人肾上腺素(EPI）Elisa检测试剂盒 Human Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人雌二醇受体(ER）Elisa检测试剂盒 Human Estradiol receptor,ER ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP）Elisa检测试剂盒 Human Parathyroid Hormone Related Protein,PTHrP ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人血管紧张素原(aGT）Elisa检测试剂盒 Human angiotensinogen,aGT ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ）Elisa检测试剂盒 Human angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人卵泡抑素(FS）Elisa检测试剂盒 Human Follistatin,FS ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人甲状腺素抗体(TAb）Elisa检测试剂盒 Human Parathyroid Hormone Related Protein,PTHrP ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人儿茶酚胺(CA）Elisa检测试剂盒 Human catecholamine,CA ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人半*蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C）Elisa检测试剂盒 Human Cystatin C,Cys-C ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人乙酰*受体抗体(AChRab）Elisa检测试剂盒 Human acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人5羟色胺(5-HT）Elisa检测试剂盒 Human 5-Hydroxytryptamine,5HT ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人抑制素A(INH-A）Elisa检测试剂盒 Human Inhibin,INH-A ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人性激素结合球蛋白(SHBG）Elisa检测试剂盒 Human sex hormone-binding globulin,SHBG ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人脱氢表雄酮S7(DHEA-S7）Elisa检测试剂盒 Human Dehydroepiandrosterone S7,DHEA-S7 ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人脱氢表雄酮(DHEA）Elisa检测试剂盒 Human Dehydroepiandrosterone,DHEA ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人降钙素基因相关肽(CGRP）Elisa检测试剂盒 Human calcitonin gene related peptide,CGRP ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人*(SS）Elisa检测试剂盒 Human Somatostatin,SS ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人生长激素释放多肽(GHRP）Elisa检测试剂盒试剂盒 Human Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人抑制素B(INH-B）Elisa检测试剂盒 Human inhibin B,INH-B ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人促甲状腺素释放激素(TRH）Elisa检测试剂盒 Human growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人雌激素(E）Elisa检测试剂盒 Human estrogen,E ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人褪黑素(MT）Elisa检测试剂盒 Human Melatonin,MT ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人6酮前列腺素(6-K-PG）Elisa检测试剂盒 Human 6-keto-prostaglandin,6-K-PG ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人血栓素B2(TXB2）Elisa检测试剂盒 Human Thromboxane B2,TX-B2 ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人皮质酮/肾上腺酮(CORT）Elisa检测试剂盒 Human Corticosterone,CORT ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人前列腺素E2(PGE2）Elisa检测试剂盒 Human Prostaglandin E2,PG-E2 ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人双氢睾酮(DHT）Elisa检测试剂盒 Human Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人促生长激素释放激素(GHRH）Elisa检测试剂盒 Human growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人雌激素(E）Elisa检测试剂盒 Human estrogen,E ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人孕激素/孕酮(PROG）Elisa检测试剂盒 Human Progesterone,PROG ELISA kit ELISA. 96T/48T
人超敏游离雌三醇(uE3）Elisa检测试剂盒 Human ultra Estriol,uE3 ELISA KIT ELISA. 96T/48T
人*(NA）Elisa检测试剂盒试剂盒 human Noradrenaline,NA ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人前列腺素F(PGF）Elisa检测试剂盒 human Prostaglandin F,PG-F ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人前列腺素E1(PGE1）Elisa检测试剂盒 human Prostaglandin E1,PG-E1 ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人内皮素1(ET-1）Elisa检测试剂盒 human Endothelin 1,ET-1 ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人促卵泡素(FSH）Elisa检测试剂盒 Human follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人游离β绒毛膜*(f-βhCG）Elisa检测试剂盒 human free chorionic gonadotropin,f-βhCG ELISA KIT ELISA. 96T/48T
人大内皮素(BigET）Elisa检测试剂盒 Human Big Endothelin,Big ET ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人全段甲状旁腺素(i-PTH）Elisa检测试剂盒 Human intact Parathormone ,i-PTH ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人降钙素(CT）Elisa检测试剂盒 Human Calcitonin,CT ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人促甲状腺素(TSH）Elisa检测试剂盒 Human Thyroid Stimulating Hormone,TSH ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人*(Cortisol）Elisa检测试剂盒 Human Cortisol ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人雌二醇(E2）Elisa检测试剂盒 Human Estradiol,E2 ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S）Elisa检测试剂盒 Human Dehydroepiandrosterone sulfate,DHEA-S ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人睾酮(T）Elisa检测试剂盒 Human Testoterone,T ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人游离睾酮(F-TESTO）Elisa检测试剂盒 Human Free Testoterone,F-TESTO ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人雄烯二酮(ASD）Elisa检测试剂盒 Human Androstenedione,ASD ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人雌三醇(E3）Elisa检测试剂盒 Human Estriol,E3 ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人17羟孕酮(17-OHP）Elisa检测试剂盒 Human 17-Hydroxyprogesterone,17-OHP ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人三碘甲状腺原氨酸(T3）Elisa检测试剂盒 Human Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人甲状腺素(T4）Elisa检测试剂盒 Human thyroxine,T4 ELISA Kit ELISA. 96T/48T
人甲状腺素(T4）Elisa检测试剂盒 Human thyroxine,T4 ELISA Kit ELISA. 96T/48T
