目前常用的固定系统有：

    4%聚甲醛，1.5%-2%戊二醛，1%多聚甲醛+1%戊二醛，4%多聚甲醛+0.5%苦味酸+0.25%戊二醛，96%乙醇+1%醋酸。不论采用哪些系统，使用前必须用已知效价的抗原做一系列预实验。如固定剂的种类浓度、温度、pH及固定时间等。然后做出预处理的效价，作为失活参考以再选择zui适条件。

非特异性吸附 

    非特异性吸附与酶标抗体、抗血清的稀释度、染色时间，温度及介质等有关，其中zui主要的是抗血清及标记抗体的稀释。一般认为价抗血清或标记抗体稀释到低蛋白浓度，用于标记染色可获得的结果。因为低蛋白浓度有利于降低非特异性吸附。实际应用的蛋白浓度大致在0.50mg/ml-2mg/ml。工作效价一般在1︰20-1︰400,在实际工作中，将标记抗体或抗血清稀释到1︰100倍以上则可获得理想的阳性结果，而非特异性吸附必然降得很低。

    工作浓度的选择是将标记抗体或抗血清作1︰2、1︰4、1︰8……1︰256的稀释，做已知阳性标本的标记染色观察，取其阳性沉积物明显，而非特异性吸附zui低的一稀释度做为工作浓度。

标记染色法 

    标记染色法分为直接染色法与间接染色法两种。前者的特点是特异性较高，敏感性低，标记抗体只能用于检测一种抗原。后者敏感性较强，一种标记抗体可用于多种抗原的检测。缺点是特异性较差。