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细胞悬浮培养是将细胞悬浮在液体培养基中进行的无菌培养。
培养类型和方法
(一)成批培养
将细胞培养在一定容积的密闭容器中进行培养。它是进行细胞生长和细胞分裂的生理生化研究常用的培养方法。
1.成批培养的特点培养基体积固定;必须适当搅拌;培养过程中,细胞生长,其数目不断发生变化,呈s增长;但要进行下一批培养,则生长一定时问后,需要继代转移。
2.成批培养的方法
(1)旋转培养。
(2)往返震荡培养。
(3)旋转震荡培养。
(4)搅动培养。
(二)连续培养
在培养过程中,以不断抽取悬浮培养物并注入等量新鲜培养基,使培养物不断得到养分补充,保持其恒定体积的培养。
1.连续培养的特点
(1)新鲜培养基的不断加人,保证了养分的充分供应。
(2)可使细胞保持在增殖旺盛的对数生长期中。
(3)适于大规模工业化生产。
2.连续培养的种类
(1)半连续培养:每隔一定时间倒出一定量的悬浮液,同时补充加入等量的新鲜培养液。
(2)连续培养:封闭式和开放式。
3.连续培养的方法
(1)浊度恒定法:这是根据悬浮液混浊度的提高来注入新鲜培养液的开放式连续培养。可以人为地选定一种细胞密度,用混浊度法控制细胞密度,此法敏感度提高。
(2)化学恒定法:这是按照某一固定速度,随培养液一起加入对细胞生长起限制作用的某种营养物质,使细胞增长速率和细胞密度保持恒定的一种开放式连续培养法。
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