上海一研生物科技有限公司

生化试剂常用试剂配置

时间:2016-5-30阅读:715
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    1、0.5mol/L氢氧化钠溶液  
组份浓度 0.5mol/L     ;配制量 2L  
配置方法 1.准确称取氢氧化钠40g。ELISA试剂盒

   2.用去离子水溶解并稀释至2L。  2、0.5mol/L盐酸溶液  
组份浓度 0.5mol/L     ;配制量 2L  
配置方法 1.准确量取盐酸83.4mL。 2.用去离子水稀释至2L。 


    3、含 0.5mol/L氯化钠的 0.5mol/L氢氧化钠溶液  
组份浓度 0.5mol/L氯化钠、0.5mol/L氢氧化钠   ;配制量 1L  
配置方法 1.准确量取氯化钠29.3g。 2.准确量取氢氧化钠20g。 3.用去离子水稀释至1L。 注意:此溶液供回收纤维素时使用。 


   4、0.2%葡萄糖标准溶液  ELISA试剂盒
组份浓度 0.2% ;配制量 1L  
配置方法 1.称取葡萄糖2.5g置于称量瓶中,在70℃干燥2小时。 2.干燥器中冷却至室温,重复干燥,冷却至恒重。 3.准确称取葡萄糖2.000g。 4.用去离子水溶解并定容至1L 5.于4℃保存。 


   5、250μg/mL牛血清白蛋白标准液  组份浓度 250μg/mL ;配制量 2L  
配置方法 1.准确称取250mg标准牛血清白蛋白。 2.用0.03mol/LpH7.8的磷酸缓冲液溶解并定容至1L。 3.4℃保存。 


   6、Folin试剂甲  
配置方法 1.称取10g氢氧化钠溶于400mL去离子水中,加入50g*,溶解,待用。2.称取0.5g酒石酸钾钠,溶于80mL去离子水中,加入0.25g硫酸铜?5水,溶解。3.将1:2:去离子水按20:4:1的比例混合即可。 4. 4℃保存,可用一周。  


    7、Folin试剂乙  配置方法: ELISA试剂盒
 
 1.在500mL的磨口回流装置内加入钨酸钠?2水25.0359g, 钼酸钠?2水6.2526g,去离子水175mL,85%磷酸12.5mL, 浓盐酸25mL,充分混合。 
 
 2.回流10小时,再加硫酸锂37.5g,去离子水12.5mL及数滴溴。  

 3.然后开口沸腾15min,以驱除过量的溴,冷却后定容到250mL。
   
 4.于棕色瓶中保存,可使用多年。

注意:上述制备的Folin试剂乙的贮备液浓度一般在2mol/L左右,几种操作方案都是把Folin试剂乙稀释至1mol/L的 浓度作为应用液,我们这时是把贮备液于使用前稀释18 倍,使之浓度为0.1mol/L略高。这种稀释18倍后的Folin 试剂乙就是上文称之为的“应用液”。Folin试剂乙贮备 液浓度的标定,一般是以*为指示剂。用Folin试剂乙去滴定1mol/L左右的标准氢氧化钠溶液,当溶液颜色由红变为紫灰,再突然变成墨绿即为终点,如果用氢氧化钠去滴定Folin试剂乙,终点不太好掌握,溶液地颜色是由浅黄变为浅绿,再变为灰紫色为终点。 
ELISA试剂盒

 8、DNS试剂 (3,5-二硝基水杨酸试剂)  
配置方法 1.取3,5-二硝基水杨酸10g,加入2mol/L氢氧化钠溶液200mL。2.将3,5-二硝基水杨酸溶解,然后加入酒石酸钾钠300g。 3. 待其*溶解,用去离子水稀释至2000mL,棕色瓶保存。

 9、5%蔗糖溶液  
组份浓度 5% ;配制量 1L  
配置方法 称取蔗糖50g,用去离子水溶解定容至1L。

 10、0.1mol/L蔗糖溶液  ELISA试剂盒
组份浓度 0.1mol/L ;配制量 1L  
配置方法 称取蔗糖34.230g,用去离子水溶解并定容至1L。 

 11、20%乙酸溶液  
组份浓度 20% ;配制量 1.2L  
配置方法 量取冰乙酸300mL,用去离子水稀释至1200mL。


 12、30%(W/V)Acrylamide  
组份浓度 30%(W/V)Acrylamide 0.05% ;配制量 1L  
配置方法 1.称量下列试剂,置于1L烧杯中 Acrylamide 290g 、BIS 10g 2.向烧杯中加入约600mL的去离子水,充分搅拌溶解 3.加入去离子水将溶液定容至1L,用0.45μm滤膜滤去杂质。 4.于棕色瓶中4℃保存。 注意:丙稀铣胺具有很强的神经毒性,并可通过皮肤吸收,其作用有积累性,配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为有可能含有少量的未聚合成份。

ELISA试剂盒
 13、40%(W/V)Acrylamide  
组份浓度 40%(W/V)Acrylamide 0.05% ;配制量 1L  
配置方法 1.称量下列试剂,置于1L烧杯中 Acrylamide 380g、BIS 20g  2.向烧杯中加入约600mL的去离子水,充分搅拌溶解 3.加入去离子水将溶液定容至1L,用0.45μm滤膜滤去杂质。 4.于棕色瓶中4℃保存。  
     注意:丙稀铣胺具有很强的神经毒性,并可通过皮肤吸收, 其作用有积累性,配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为有可能含有少量的未聚合成份。 


 14、10%(W/V)过硫酸铵  
组份浓度 10%(W/V)过硫酸铵;   配制量 10mL  
配置方法 1.称取1g过硫酸铵。 2.加入10mL的去离子水后搅拌溶解。 3.贮存于4℃。 注意:10%过硫酸胺溶液在4℃保存时间可使用2周左右,超过期限会失去催化作用。 

ELISA试剂盒
 15、考马斯亮蓝R-250染色液 
组份浓度 0.1%(W/V)考马斯亮蓝R-250,25%(V/V)异丙醇, 10%(V/V)冰醋酸  配制量 1L  
配置方法 1.称取1g考马斯亮蓝R-250,置于1L烧杯中。 2.量取250mL的异丙醇加入上述烧杯中,搅拌溶解。 3.加入100mL的冰乙醋酸,均匀搅拌。 4.加入650mL的去离子水,均匀搅拌。 5.用滤纸出去颗粒物质后,室温保存。 


 16、考马斯亮蓝染色脱色液  
组份浓度 10%(V/V)醋酸,5%(V/V)乙醇     ;配制量 1L  
配置方法 1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。 醋酸100mL、 乙醇50mL 、H2O850mL 2.充分混合后使用。

 17、凝胶固定液 (SDS-PAGE银氨染色用)  
组份浓度 50%(V/V)甲醇,10%(V/V)醋酸     ;配制量 100L  
配置方法 1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。 甲醇500mL 、醋酸 100mL 、H2O 400mL 2.均匀混合后室温保存。 


 18、凝胶处理液 (SDS-PAGE银氨染色用)  
组份浓度 50%(V/V)甲醇,10%(V/V)戊二醛     ;配制量 1L  
配置方法 1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。 甲醇50mL 、 戊二醛 10mL 、H2O 40mL 2. 均匀混合后室温保存。 

ELISA试剂盒
19、凝胶染色液 (SDS-PAGE银氨染色用)  
组份浓度 0.4%(W/V)*,1%(V/V)浓氨水,0.04%(W/V)氢氧化钠 ;配制量 100L  配置方法:1.量取下列试剂,加入100~200mL试剂瓶中。 20%* 2mL  
浓氨水 1mL 4%氢氧化钠 1mL H2O 96mL 2.均匀混合。该溶液应为无色透明状。如氨水浓度过低时溶液会呈现混浊状,此时应补加浓氨水,直至透明。  3.本染色液应现用现配,不宜保存。


20、显影液 (SDS-PAGE银氨染色用)  
组份浓度 0.005%(V/V)柠檬酸,0.02%(V/V)甲醛     ;配制量 1L  配置方法 1.称取下列试剂,置于1L试剂瓶中。 柠檬酸 50mg 甲醛 0.2mL  2.加入1L去离子水后,摇动混合后溶解。 3.室温保存。 ELISA试剂盒

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