当前位置:上海研生生化试剂有限公司>>技术文章>>细胞株的培养
选择培养基没有一定的标准,有几点建议可供参考: (1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。 (2)其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。 (3)根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小
选择培养基没有一定的标准,有几点建议可供参考:
(1)建立某种细胞株所用的淋巴细胞培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。
(2)其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。
(3)根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640 。
(4)用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择培养基,这是zui客观的方法,但比较繁琐。
很多细胞生长要求在培养液中添加*。*在溶液中很不稳定,应置于-20?C冰冻保存,用前加入培养基中。加有*的液体培养基4?C 冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的*。另一种选择是使用L-*的衍生物 - L-alanyl-L-glutamine dipeptide(如启维益成公司代理的GenDepot的产品Glutaplex配方中含有的成分之一) 替代L-*。Glutaplex与L-*相比更加稳定,降解比较慢,提高细胞的存活和生长,极大降低对细胞有毒性的氨的积累。
3.培养基中是否应加酚红:
酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂,中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用,特别是雌激素。为避免固醇类反应,培养细胞尤其是哺乳类细胞时,应使用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时不使用加酚红的培养基。
4.使用血清应注意的问题:
1)血清*次使用前,是否应在56oC,30分钟加热血清以灭活补体系统?
激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。实验显示,经过正确处理的热灭活血清对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞生长只有微小的促进或*没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率降低。而经过热处理的血清沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染。而把血清放在37℃环境中又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。若非必须,可以不需要做热处理这一步。不但节省时间,更确保血清的质量。
请输入账号
请输入密码
请输验证码
以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,环保在线对此不承担任何保证责任。
温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。