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脱片问题
Poly-L-Lysine(多聚赖氨酸)为目前免疫组化染色工作中zui常用的一种防脱片剂，6ml的多聚赖氨酸溶液可按1:10稀释成60ml的工作液，适合于需要酶消化、微波、高温高压的防脱片处理。如不行，可用双重处理（APES和Poly-L-Lysine）的切片。在以上两种条件都行不通的情况下，可用如下方法：切片在脱蜡前，放在APES 1:50 丙酮溶液中浸泡3分钟，晾干，即可进行下一步。抗体
灭活内源性酶
（1）HRP系统：3%双氧水灭活
（2）AP系统：3%HAc灭活。
暴露抗原
对于石蜡切片的免疫组化实验时，必须采用高温加热抗原修复，这将有助于暴露抗原决定簇，从而增加免疫组化染色的强度(不同抗体的*修复液请参阅抗体说明书)。对于不同的组织，不同的抗原，不同的抗体，所采用的方法应不一样，可进行热修复、*消化、既不修复也不消化。胶原还可以用*消化等。
封闭
在山羊血清封闭，非特异性染色仍然较强时，可延长封闭时间或用浓缩血清封闭
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