试剂盒组成

1
30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶
7
终止液 6ml×1瓶
2
酶标试剂 6ml×1瓶
8
标准品（3200μmol/L） 0.5ml×1瓶
3
酶标包被板 12孔×8条
9
标准品稀释液 1.5ml×1瓶
4
样品稀释液 6ml×1瓶
10
说明书 1份
5
显色剂A液 6ml×1瓶
11
封板膜 2张 
6
显色剂B液 6ml×1/瓶
12
密封袋 1个

标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融ELISA试剂盒
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1.         标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

1600μmol/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
800μmol/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
400μmol/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
200μmol/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
100μmol/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2.         加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.         温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  4.         配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.         洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.         加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.         温育：操作同3。
8.         洗涤：操作同5。
9.         显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.     终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.     测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
 ELISA试剂盒