上海谷研实业有限公司

合适的细胞培养基和血清怎样选择

时间:2016-3-22阅读:186
分享:

     细胞培育是试验室里zui常见和zui基本的实验,但是不是zui简单的。别以为细胞培育是一件简单的事,这里也蕴藏着许多学问。有的时候细胞状况不好的话,会导致转染、药筛这些实验底子没办法做。影响细胞培育的因素有很多,我们先从培养基和血清开始说。

     经典的细胞培养基有很多种,例如Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是运用zui广泛的。其他的例如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培育。

◆MEM是由Eagle’s基础培育基(BME)开展而来的,其间添加了成分的规格及浓度。

◆Dulbecco改进的BEM(DMEM)培养基是专为小鼠成纤维细胞准备的,常用于贴壁细胞的培育。DMEM中氨基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,选用双倍的HCO3-和CO2浓度可以起到十分好的缓冲效果。开端的配方中葡萄糖含量为1000 mg/L,后来为了满足某些细胞的成长需求,将葡萄糖含量调整为4500 mg/L,这就是我们常说的低糖和高糖了。

◆aMEM含有附加的氨基酸、维生素以及核苷和脂肪酸,它可以广泛用于各种细胞类型,包括对营养成分需求严苛的细胞。

◆Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而规划的,如今也广泛运用于克隆构成率的剖析及原代培育。F12还能够与DMEM等体积混合运用,得到一种高浓度与成分多元化相的产品,这种培养基已运用于许多原代培育及更难养的细胞系的培育。

 

◆RPMI 1640培养基是用于淋巴细胞培育的,如今已广泛用于悬浮细胞的培育。

     曾经常常听到有人问,这种细胞该用哪一种培养基呢?其实这个疑问的答案可以很简单,也可以很复杂。若是这种细胞是购自ATCC或其他的细胞库,那很简单,问供货商就行了。或参考有关的文献。Invitrogen上有一个Cell Line Database的东西,也很好用。挑选你感兴趣的细胞类型,它就会显示相应的培养基、血清和转染试剂等,有时还有优化好的转染进程,很方便。Sigma上也有一个Media Expert,包括培养基一切成分的功用描绘、运用推介和参阅文献等,它仍是一个解决问题的能手,关于细胞培育中的常见疑问,如细胞贴壁欠好、培养基变色等,它都会列出相应的缘由,并提供解决的办法。

    如果你是准备树立一种全新细胞的培育体系,并且找不到任何参阅,那你就得花时间自己实验了。在MEM中培育的细胞,很能够在DMEM或M199中成长。总之,MEM做贴壁细胞培育、RPMI 1640做悬浮细胞培育是一个好的开始。你也可以购买多种培养基,然后花大概两周的时间先做一个比较简单的细胞成长试验,然后从中挑选zui合适的。

     以前大多数实验室都是用干粉培养基,但是制作的过程比较麻烦,需要溶解、调节pH值,过滤,在此过程中还会发生浓度误差,而且有些实验室的水质并不抱负,所以培育的效果会有差别。如果使用液体培养基,这种人为的误差会降低。可能你会觉得液体培养基比较贵,以前是这样,但是现在不一样了。HyClone和Invitrogen都在国内建立了液体培养基的生产基地,生产和运输的成本大大下降,所以如今的价格也比较便宜,比干粉培育基贵不了多少,而且还帮你省了过滤器和时间。

    血清富含成长因子,可以推进细胞的繁衍,富含的附着因子可推进细胞的贴壁,一起还具有抗*活性。血清也是矿物质、脂类及激素的重要来源。zui常用的血清有小牛血清、重生牛血清、胎牛血清和马血清等。牛血清是按照采血时间的早晚来分类的。采血时间越早,营养物质越丰富,所含抗体也越少,因而胎牛血清适合需求高的细胞系和克隆化培育。由于疯牛病的原因,到目前为止,中国政府依然制止从北美洲、欧洲和日本等地区进口牛血清,因此国内市面上的牛血清大多来自澳洲、南美洲,或是国产的

会员登录

×

请输入账号

请输入密码

=

请输验证码

收藏该商铺

X
该信息已收藏!
标签:
保存成功

(空格分隔,最多3个,单个标签最多10个字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我们将在第一时间回复您~

以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,环保在线对此不承担任何保证责任。

温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。

在线留言