现货供应：SMMC-7721细胞,人肝癌细胞说明书产品经无数次市场验证，若出现质量问题（非人为的）可无条件换货或退货,详细信息：
规格：70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶
特点：细胞代数为4-5代左右
细胞检测：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
收到“SMMC-7721细胞,人肝癌细胞说明书"后应如何去正确的处理：
您需要准备好细胞所要用到的培养基和相关试剂,虽然所有的贴壁,半贴壁或者悬浮细胞处理方式差不多,但是不同的实验室培养条件和处理力度还有试剂的批间差这些问题存在,也会导致对细胞处理不当,或者环境的不适应而造成细胞的死亡。
1） 收到细胞,*时间要镜检：观察细胞形态是否正常,对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好,观察细胞密度,有疑议及时咨询提供细胞的技术人员。由于运输的 时间或者温度的变化,很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样,主要是贴壁牢固问题。比如293T,平时贴壁就不是很牢,在装满的 培养基瓶子里面,会发生大片的脱落,细胞聚集在一起,但是细胞生长还是正常的,通过离心收集,加以*的消化,重新打散,又可以正常的贴壁生长。
2） 当通过上一步的观察,细胞初步没有任何问题时,进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时,则处理如下：弃除瓶中大部分培养基,仅保留5到10mL 培养所需的常规培养基；或更换新鲜的培养基,置于培养箱中,随后每天观察。细胞在低于正常生长温度情况下,会调整为静止期,或者慢速生*,必须恢复37 度的环境至少3个小时左右,才能重新调整到接近对数生*的状态,在对数生*进行细胞的传代会大大增加传代的成功率,和细胞的存活率。
3）如果经*步观察发现“"密度超过90%,并且细胞状态很好时,则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快,状态稳定,不易受外界影响的细胞 可 以一次多传几瓶；对于生长较慢,细胞比较薄,状态容易波动的细胞类型,一次少传些,保证每瓶细胞密度大些,便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞,*次 处理也可以依照第二种情况。
售后：收到细胞后7天，如发现细胞有质量问题（如污染，死亡，快递运输等原因）时，应出具书面质量问题报告并及时传真或致销售人员，我们将尽快为您解决。
操作方法
固定 | 培养细胞的制片或冰冻切片用4%多聚甲醛固定30min(4℃)后，用80%酒精再固定2h（-20℃）。常规4%中性福尔马林固定、石蜡包埋之切片进行脱蜡、水化。 |
洗涤 | 玻片浸入PBS缓冲液，摇床上洗涤5min，三次。 |
反应 | 洗涤后的玻片用吸水纸吸干细胞或组织周围水分，按50μl/cm2滴加反应液（每50μL反应液含TdT酶0.5μL,标记的-dUTP 1μL），使反应液均匀地覆盖于所有细胞或组织切片上，盖上塑料盖玻片，置湿盒中，37℃孵育1h。 |
终止反应 | 去掉塑料盖玻片，将玻片置盛有洗涤缓冲液的染色缸内，洗涤两次，每次5min。 |
FITC标记 | 洗涤后的玻片用吸水纸吸去细胞或组织周围水分，按50μl/cm2滴加FITC反应液（含FITC 2.5μg/mL），室温下避光孵育10min。 |
洗涤 | 将玻片置于洗涤缓冲液内，洗两次，每次5min。 |
PI复染 | 将玻片置于盛有PI染液的染色缸内，室温下避光染色30min。 |
封片 | 用盖玻片直接盖在含PI染液的玻片上，亦可用无色指甲油涂于盖玻片四周边缘，置暗盒中，尽早镜检观察。 |
交货时间 | 10~15天 |
客户须知（对材料的要求、注意事项）
结果提供：正常和阳性对照玻片及其1张数码照片，剩余石蜡块，检测报告；
样本要求：取材保持组织新鲜（组织块以小于2cm×1.5cm×0.3cm为宜），立即放入固定液中（固定液用10%福尔马林液或4%多聚甲醛缓冲液，体积为组织块的10倍以上），避免干燥；对于有血迹的样本，可用PBS液或生理盐水冲洗后直接放入固定液中；经固定后的样本必须在48小时内处理。
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