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江苏菲亚生物科技有限公司
阅读:251发布时间:2015-10-12
做ELISA实验收集血浆样本时为什么要加抗凝剂?顾名思义,抗凝剂就是为了防止血液凝固的。加了抗凝剂后,血液在一定的时间内会保持原来的物理化学状态。如果没加抗凝剂,血浆是凝聚在一起的,不好测定。常见的抗凝剂有哪些,各自又有什么优点?江苏菲亚公司技术为您详细总结如下:
1.乙二胺四乙酸(Ethylene Diamine Tetraacetic Acid,EDTA)盐
常用有钠盐或钾盐,能与血液中钙离子结合成螯合物,使Ca2+失去凝血作用,阻止血液凝固。
Na2C10H14O8N2+Ca2+→ CaC10H12O8N2+2Na++2H+
特点:对血细胞形态、血小板计数影响很小(但影响血小板聚集)。不适于凝血检查、血小板功能试验。
根据血液学标准化委员会(International Committee for Standardization of hematology , ICSH ) 1993年文件建议,血细胞计数用EDTA-K2作抗凝剂(EDTA-K2-2H2O 1.5~2.2mg/ml血液)。
2.草酸盐
常用有草酸钠、草酸钾、草酸铵,溶解后解离的草酸根离子能与样本中钙离子形成草酸钙沉淀,使Ca2+失去凝血作用,阻止血液凝固。2mg草酸盐可抗凝lml血液。但不适于凝血检查。而且,草酸盐浓度过高还会导致溶血、改变血液pH,干扰血浆钾、钠、氯和某些酶活性的测定。
双草酸盐抗凝剂:适用于血细胞比容、CBC、网织红细胞计数等检查,不适于血小板计数、白细胞分类计数。
3.肝素
是加强抗*Ⅲ(AT-Ⅲ)灭活*蛋白酶作用,阻止*的形成,并阻止血小板聚集等作用,从而阻止血液凝固。肝素是红细胞透渗脆性试验的理想抗凝剂。但不适于CBC、细胞形态学检查。每毫升血液肝素用量为(15±2.5)U,多为*盐或钾盐。
4.枸橼酸盐
常用的有*,能与血液中钙离子结合形成螯合物,阻止血液凝固。枸橼酸盐抗凝剂的抗凝力不如上述抗凝剂。*与血液的抗凝比例为l:9或1:4.适用于红细胞沉降率、凝血检查,是输血保养液的成分。
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