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菲亚技术分析:elisa实验阴性对照需要做梯度稀释吗

阅读:258发布时间:2015-11-26

 江苏菲亚生物科技有限公司主要ELISA试剂盒,主要合作对象是学校,医院、研究所等科研单位。学校客户以新手为主。所以常有客户咨询未处理阴性对照需要做梯度稀释吗:以小鼠血清为例,小鼠的血清是直接拿来作为阴性对照,还是要进行稀释?如果要稀释,该怎么稀释才科学?

从理论上说,阴性对照的血清,不论稀释多少倍,OD值都不应该有明显变化。有两种可能:

1.正常小鼠本身含有该抗原的抗体;

2.ELISA过程中非特异性反应去除不干净,如洗板、孵育温度时间、抗原抗体浓度等,这样稀释倍数越高的样本其对结果的影响就越小,就呈现逐渐下降的趋势。你的阴性孔的OD值有多少呢,正常情况应低于0.1,不然就要优化下整个实验体系了。
    判断阴阳性,以阴性OD值的2倍作为判断标准只是根据我们一般的经验而定,更科学的方法是,测定一批阴性样品(比如20个以上),计算OD平均值及标准差,以平均值+2或3倍标准差作为阴阳性的界限。

    江苏菲亚技术为您提供更多ELISA检测技术,为实验新手打开方便之门,如有疑问可致电于我司技术咨询!

 


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