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丙二醛“MDA”指标含量检测操作方法

阅读:323发布时间:2016-4-21

    测试所需仪器设备:可见光分光光度计,可调到95℃左右的恒温水浴箱(或者铝锅内放几个去掉盖子的易拉罐,将罐壁及底部穿数十个孔,以便水的进入,用来代替水浴箱)。离心机。

一、旋涡混匀器混匀,试管口用保鲜薄膜扎紧,用针头刺一小孔,95℃水浴(或用锅开盖煮沸40分钟),取出后流水冷却,然后3500~4000转/分,离心10分钟,取上清液,532nm处,1cm光径,蒸馏水调零,测各管吸光度值。

二、以a表示所取的样品量,标准品量,无水乙醇的量、试剂一的量,四者均相等,例如样品取0.1mL,则标准品、无水乙醇及试剂一也取0.1mL,若样品取0.2mL,则标准品、无水乙醇及试剂一也取0.2mL。因吸光度与加样量呈正比曲线,因而结果不受影响。

三、一般情况下,标准管、标准空白及测定空白管每批只需做1~2只,若测定管中蛋白量不是太高,则测定空白管可以不测,用标准空白管来代替测定空白管。

四、吸取上清比色时了好用移液器吸取上清加入比色皿中,尽量避免倾倒,以免沉淀进入比色皿,影响吸光度。

注1.用此方法,所测各管吸光度值比规范操作方法要高,但不影响zui终结果。
注2.5%组织匀浆a*取0.1~0.2mL进行检测较好。
注3.若发现检测样本吸光主葢低,可以将水浴时间40分钟延长至80分钟,但您的同一课题中MDA的检测都必须延长至80分钟,以免造成批间差异。
注4.此方法标准管参考吸光度:当标准品取样量为0.1mL时,则标准管吸光度减去标准空白管吸光度为0.103~0.112。当标准品取样量为0.2mL时,则标准管吸光度减去标准空白管吸光度为0.206~0.224。

 


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