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酶联免疫吸附实验直接法和间接法优缺点

时间:2017-3-30阅读:345
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酶联免疫吸附实验直接法和间接法优缺点
酶联免疫吸附实验直接法和间接法优缺点
因为ELISA酶联免疫吸附实验具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。已成为分析化学领域中的前沿课题 ,它是一种特殊的试剂分析方法。
elisa可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂:
(1)固相的抗菌素原或抗体,即"免疫吸附剂"(immunosorbent);
(2)酶标记的抗原或抗体,称为"结合物"(conjugate);
(3)酶反应的底物。根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不类型的检测方法。
elisa可根据抗原抗体的结合情况来分类为以下两种方法。
直接法(direct elisa)
    将抗原直接固定在固相载体上,加入酶标记的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要。
优势:操作手续简短,因无须使用二抗可避免交互反应。
缺点:试验中的一抗都得用酶标记,但不是每种抗体都适合做标记,费用相对提高。
间接法(indirect elisa)
    此测定方法与直接法类似,差别在于一级抗体没有酶标记,改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。
优势:二抗可以加强信号,而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则能保留它zui多的免疫反应性。
缺点:交互反应发生的机率较高。

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