细胞名称:CTLL-2 小鼠T细胞
组织来源:T细胞
培养条件:RPMI-1640 +10% FBS +100U/mL rmIL-2
形 态:悬浮;淋巴细胞样
背 景:具有细胞毒作用的T-细胞株。IL-2依赖型。
CTLL-2(小鼠T细胞)分离方法如下:
①过夜冷消化 将取得的组织用Hanks液洗三次,剪成碎块大小为4毫米左右,用Hanks液洗2~3次以除去血球和脂肪组织,再加入0.25%的*,摇匀后放4℃过夜,次日再用Hanks液洗涤,弃去上清,共洗2~3次,然后,加入少量营养液吹打分散,细胞计数,按适当的浓度分瓶培养。
②多次提取消化法 多次提取消化法有以下三种:
1、热消化多次提取 将剪碎的细胞块加入0.25%*37℃水浴中消化15~20分钟,CTLL-2(小鼠T细胞)然后经洗涤后用营养液分散制成细胞悬液,按合适的浓度分瓶培养,然后将留下的未*消化的组织按上述方法操作,再消化提取细胞。
2、冷消化多次提取 方法同上,只是消化温度为4℃。
3、先热消化后冷消化 将组织块先用*于37℃下消化20分钟经洗涤后用营养液分散,制成悬液,剩余未消化的小组织块经洗涤后用*于4℃下过夜,次日再提取细胞,分散成悬液,分瓶培养。
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