1×RIPA裂解液（强）（不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂） 产品描述

RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)，其本意是Radio Immunoprecipitation Assay，是一种传统的细胞组织快速裂解液，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用。根据其裂解液的强度不同，大致可以分为强、中、弱三类。

本品为裂解强度相对较强的RIPA裂解液（1×），裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。

1×RIPA裂解液（强）（不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂）运输与保存方法

冰袋（wet ice）运输。

-20℃保存，1年有效。尽量避免反复冻融，建议分装后使用。

1×RIPA裂解液（强）（不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂）注意事项

1）本品不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂，使用前请根据实验情况添加合适酶抑制剂。

2）裂解样品的所有步骤均需在冰上或4℃进行。

3） 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（YEASEN CAT NO.20201ES76）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

1×RIPA裂解液（强）（不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂）使用说明：

(一) 培养细胞样品：

1）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF等抑制剂，使PMSF的zui终浓度为1mM。

【注】：请根据实验情况选用酶抑制剂。

2）贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。

悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。

3）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。

（二）组织样品：

1）把*切成细小的碎片。

2）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF等抑制剂，使PMSF的zui终浓度为1mM。

【注】：请根据实验情况选用酶抑制剂。

3）按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)

4）用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。

5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

6）如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分1×RIPA裂解液（强）（不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂）
kl-9388R CNOT8细胞表面趋化因子受体4相关蛋白8抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
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kl-4503R CTAG1B肿瘤/睾丸抗原1B 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
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kl-9774R C10orf13210号染色体开放阅读框132抗体 【性 状】： Lyophilized or Liquid【浓 度】： 1mg/1ml
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