小鼠杂交瘤细胞(抗人促红细胞生成素)以高品质、低价格、快供货、更优服务为广大科研者提供更为完善的产品供应渠道和售后服务。
培养条件:DMEM+10%FBS;37℃,5%CO2
规格:70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶
细胞传代:1:3 传代
细胞来源:ATCC、sciencell、ICLC
货期:1-2周
产品运输方式:干冰或者活体细胞运输,本公司保证细胞运输中的存活率细胞融合与杂交瘤小鼠杂交瘤细胞(抗人促红细胞生成素)的选择性培养:
细胞融合的程序已报道的有很多种,这里介绍的是作者所在实验室常用的一种。
A、 将1×108脾细胞与2×107-5×107骨髓瘤细胞SP2/0-Ag14混合于一支50ml融合管中,补加不*培养基至30ml,充分混匀。
B、 1000r/min离心5-10分钟,将上清尽量吸净。
C、 在手掌上轻击融合管底,使沉淀细胞松散均匀;置40℃水浴中预热。
D、 小鼠杂交瘤细胞(抗人促红细胞生成素)用1ml吸管在1分钟左右(zui好时间为45秒)加预热至40℃的50% PEG(PH 8.0)1ml,边加边轻轻搅拌。
E、 用10ml吸管在90秒内加20-30ml预热至37℃的不*培养基;20-37℃静置10分钟。
F、 1000r/min 5分钟;弃去上清。
G、 加入5ml HAT培养基,轻轻吹吸沉淀细胞,使其悬浮并混匀,然后补加含腹腔巨噬细胞的HAT培养基至80-100ml。
H、 分装96孔细胞培养板,每孔0.10-0.15ml;分装24孔板,每孔1.0-1.5ml;然后将培养板置37℃,6% CO2培养箱内培养。
I、 5天后用HAT培养基换出1/2培养基。
J、 7-10天后用HT培养基换出HAT培养基;(第14天后可用普通*培养基)。
L、 小鼠杂交瘤细胞(抗人促红细胞生成素)经常观察杂交瘤细胞生长情况,待其长至孔底面积1/10以上时吸出上清供抗体检测。
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