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ELISA试剂盒实验结果的准确性
ELISA试剂盒试验时,注意事项:
1.正式试验时,应别离以阳性对照与阴性对照操控试验条件,待检样品应作一式二份,有时本底较高,阐明有非特异性反响,可选用羊血清、兔血清或BSA等关闭。
2.在大鼠ELISA试剂盒中,进行各项试验条件的挑选是很主要的,其间包含:
(1)固相载体的挑选:很多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其方式可所以凹孔平板、试管、珠粒等。现在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。大鼠ELISA试剂盒不论何种载体,在运用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一试验条件下进行反响,调查其显色反响是不是均一性,据此判明其吸附功能是不是杰出。
(2)包被抗体(或抗原)的挑选:将抗体(或抗原)吸附在固相载体外表时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时刻及其蛋白量也有必定影响,一般多选用4℃18~24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不一样的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)ELISA试剂盒进行包被后,在其它试验条件相一起,调查阳性标本的OD值。挑选OD值zui大而蛋白量起码的浓度。关于大都蛋白质来说一般为1~10μg/ml。
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