行业产品

  • 行业产品

上海极威生物科技有限公司


当前位置:上海极威生物科技有限公司>技术文章>牛沙门氏菌ELISA检测试剂盒说明书
技术文章

牛沙门氏菌ELISA检测试剂盒说明书

阅读:305发布时间:2016-3-17

(本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断)

检测原理

  试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的牛沙门氏菌(Salmonella)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),判断样品是否含有牛沙门氏菌(Salmonella)。

  样品收集、处理及保存方法

1.  血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

  自备物品

1. 酶标仪(450nm)

2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒温箱

 

  操作注意事项

1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶*溶解后再使用。

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3. 预处理后的样本无需稀释,直接取50μL加样即可。

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5. 所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成名称 96孔配置 48孔配置 备注

微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条

阴性对照 0.6mL  0.6mL 

阳性对照 0.6mL  0.6mL 

* 6mL 3mL

检测抗体-HRP 10mL 5mL

20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释

底物A 6mL 3mL

底物B 6mL 3mL

终止液 6mL 3mL

封板膜 2张 2张

说明书 1份 1份

自封袋 1个 1个

 

 

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

  结果判断

1.  试验有效性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;

    阴性对照孔OD值平均值≤0.15。

2.  临界值(Cut off)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15

3.  阴性判断:样品OD值<临界值(Cut off),样品为阴性

4.  阳性判断:样品OD值>临界值(Cut off),样品为阳性

  试剂盒性能

1. 准确性:阳性对照孔OD值平均值≥1.00;阴性对照孔OD值平均值≤0.15,说明试验结果有效。

2. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

3. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。

4. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。

5. 有效期:6个月

  免责声明

1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。

2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。


环保在线 设计制作,未经允许翻录必究 .      Copyright(C) 2021 https://www.hbzhan.com,All rights reserved.

以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,环保在线对此不承担任何保证责任。 温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。

会员登录

×

请输入账号

请输入密码

=

请输验证码

收藏该商铺

登录 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我们将在第一时间回复您~