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牛副结核ELISA

阅读：133发布时间：2016-3-21

（一）材料与试剂 
1．副结核分枝杆菌亲和层析抗原 
2．草分枝杆菌吸收抗原 
3．兔抗牛IgG酶标抗体 
4．牛副结核病参考阳性血清 
5．牛副结核病参考阴性血清 
1～5项均由单位供应。 
6．器材elisa板, 酶联免疫吸附检测仪、加样器、洗瓶、恒温箱等。 
7．试剂及溶液配制同第五节猪瘟ELISA。 
（二）操作方法 
1．抗原包被以抗原稀释液将副结核亲和层析抗原稀释至50μg/ml,每孔包被0.1ml。部分对照孔以牛血清白蛋白(50μg/ml)包被。 
2．血清处理取待检血清、参考阳性血清、参考阴性血清各0.10ml，加生理盐水0.80ml，加草分枝杆菌吸收抗原0.10ml，混匀，37℃感作1h。取0.10ml，加血清稀释液0.90ml(注意血清稀释液中加牛血清白蛋白，不加犊牛血清)。混匀即可 
3．正式试验按表12－4进行。每个样品加2孔，以求OD平均值。 
表12－4ELISA试验程序表(单位ml)

（三）结果判定
在对照组成立的前提下, 即参考阳性血清呈棕黄色,参考阴性血清及其它对照孔呈无色或浅黄色, 判定待测结果。
1．目测判定与参考阳性血清孔颜色相当，即呈棕黄色，判为ELISA阳性(＋)。
2．酶标仪判定(490nm)以底物溶液对照孔调零，校正参考阳性血清OD值为1.0(或相应规定值)，测定待检孔。当OD≥0.50，判ELISA阳性(＋)；0.40≤OD≤0.49判ELISA可凝(±)；OD<0.40，判ELISA阴性(－)。


商铺：https://www.hbzhan.com/st161127/

主营产品：elisa试剂盒，细胞株，抗体，生物试剂


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