此为简要说明书
促甲状腺素（TSH）测定试剂盒（酶联免疫法）说明书
【产品名称】
通用名称：促甲状腺素（TSH）测定试剂盒（酶联免疫法）
英文名称：Detection Kit for thyroid-stimulating hormone（TSH）（Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA）
【包装规格】96人份/盒，48人份/盒
【预期用途】
用于体外定量测定人血清中促甲状腺素（TSH）的含量。
TSH是诊断甲状腺功能和研究下丘脑-垂体-甲状腺轴的重要指标之一，尤其对先天性甲低有重要意义。在甲状腺功能评估中，可鉴别原发性和继发性（垂体和下丘脑性）甲状腺功能低下症。并可作为对甲低症疗效观察指标。此外，可观察垂体TSH的储备功能，进一步区别下丘脑和垂体的病变[1]。
【检验原理】
采用酶联免疫分析方法。采用两株单克隆抗体，一株用于固相包被制备固相抗体，另一株用于HRP的标记制备HRP-抗体。在包被抗体的微孔中加入TSH（标准或待测样品）及HRP-抗体，平衡后形成“固相抗体-抗原-HRP-抗体”的复合物。经加底物显色后，随着TSH浓度的升高，显色A值（或称吸光度、OD值）呈逐渐上升的线性关系。
【主要组成成分】
表1 试剂盒主要组成成分
规格 组分 | 数量 | 体积 | 制品状态 | 主要成分 |
96T | 48T | 96T | 48T |
1）TSH校准品（S1~S6） | 6瓶 | 0.5ml | 0.5ml | 液 体 | TSH(0.3、0.6、1.5、3.0、6.0、12.0mIU/L)，0.02M磷酸盐缓冲液，2%牛血清白蛋白（BSA），0.1% Proclin-300 |
2）酶标抗体 | 1瓶 | 6ml | 3ml | 液 体 | 酶标-抗-TSH（单抗），0.02M磷酸盐缓冲液，20%新生牛血清，0.1%Proclin-300，0.01%食品红 |
3）质控品 | 2个水平各一支 | 1ml | 1ml | 液 体 | TSH，*正人血清，0.1% Proclin-300 |
4）显色剂A | 1瓶 | 7ml | 3.5ml | 液 体 | 11mmol/L 过氧化脲素 |
5）显色剂B | 1瓶 | 7ml | 3.5ml | 液 体 | 2mmol/L 3,3',5,5'-四甲基联苯胺 |
6）终止液 | 1瓶 | 7ml | 3.5ml | 液 体 | 2mol/L硫酸 |
7）浓缩洗涤液（20×） | 1瓶 | 15ml | 15ml | 液 体 | 0.2M 磷酸盐缓冲液，含0.5%的吐温-20 |
8）预包被板 | 1块 | 96孔 | 48孔 | —— | 抗-TSH单克隆抗体，聚苯乙烯微孔板 |
9）封板膜 | 2张 | ———— |
10）封口袋 | 1个 | ———— |
注：校准品可溯源至中国食品药品检定研究院国家标准品（编号：150530）。
【储存条件及有效期】
2~8℃储存，有效期为12个月。
【适用仪器】
适用于各种类型的洗板机、半自动酶免分析仪。
【样本要求】
取血样后分离血清，2~8℃保存不超过48小时，*保存可冻存于-15℃以下。
【检验方法】
- 将各种试剂移至室温平衡半小时，取浓缩洗涤液，根据当批检测数量，用蒸馏水1：20稀释，混匀后备用。
- 将预包被板从密封袋中取出，设一个空白对照孔，不加任何液体；每个校准点依次各设两孔，每孔加入相应校准品100μl；其余每个检测孔直接加质控品或待测血清100μl。然后各孔加入酶标抗体50μl，充分混匀，贴上封板膜，置37℃温育2小时。
- 手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置10秒甩干，重复3次后拍干。洗板机洗板：选择洗涤3次程序洗板后拍干。
- 每孔加显色剂A液50μl，显色剂B液50μl，振荡混匀后，置37℃避光显色15分钟，每孔加终止液50μl。
- 用酶标仪读数，单波长酶标仪需先用空白对照孔调零点，然后测定各孔吸光值。
【参考区间】
正常参考区间：0.5~5.0mIU/L。
通过测定200份正常人血清，经统计学处理（正态分布，取95%置信区间）确定参考区间。
由于人的个体差异及地域、年龄和性别的不同，所确定的参考区间存在一定差异，因此本说明书所提供的参考区间仅作参考，各实验室应根据各自地区的正常人群建立自己的参考区间。
【检验结果的解释】
- 双波长酶标仪可以不设空白对照孔，也无需调零点。单波长酶标仪必须设空白对照孔，先用空白对照孔调零，然后测量。
- 作图法：以校准品S1~S6的吸光值为纵轴（log对数坐标），相应浓度为横轴(log对数坐标),在对数坐标纸上绘制校准品曲线,在校准品曲线上查出待测标本的含量。
- 计算机：由电脑计算出其浓度。
【检验方法的局限性】
1.严重溶血、乳糜血可能会影响检测结果。
2.本产品能够检测浓度达到120mIU/L的样本仍无倒勾现象，不会因为倒勾现象出现假阴性。
【产品性能指标】
- 外观和物理检查：试剂盒应组分齐全，内外包装均应完整，标签清晰，液体试剂无渗漏。各组分装量不少于表1中要求。
- 准确性：试剂盒内校准品与相应浓度的国家标准品同时进行分析测定，用双对数（Log-Log）数学模型拟合，要求两条剂量-反应曲线不显著偏离平行（t检验）；以TSH国家标准品为对照品，试剂盒内校准品的实测效价与标示值效价的比应在0.900~1.100之间。
- 剂量-反应曲线的线性：用Log-Log数学模型拟合，在0.3~50mIU/L范围内，剂量-反应曲线相关系数（r）的值应不低于0.9900。
- 精密度
4.1分析内精密度：试剂盒质控品测定结果的变异系数（CV）应不大于15.0%。
4.2分析间精密度：在多次独立分析之间，质控品测定结果的变异系数（CV）应不大于20.0%。
4.3批间精密度：在多个不同批次产品之间，质控品测定结果的变异系数（CV）应不大于20.0%。
- zui低检出限：应不高于0.10mIU/L。
- 质控品测定值：每次检测结果均应在允许范围内。
- 特异性
7.1检测浓度为200IU/L的促卵泡生成素（FSH）结果不高于0.10mIU/L。
7.2检测浓度为200IU/L的促黄体生产素（LH）结果不高于0.10mIU/L。
7.3检测浓度为1000IU/L的人绒毛膜*（hCG）结果不高于0.10mIU/L。
【注意事项】
- 本品仅供体外实验。
- 双波长仪器可以不设空白孔，也无须调零。
- 做实验前必须将试剂盒恢复至室温，加试剂前应先摇匀，加样中应避免交叉污染。
- 温育反应过程中必须贴封板膜。
- 不同批号试剂不能混用。
- 试剂中含有牛源类成分，保证来自于非疯牛病疫情国家或地区，加之本产品不直接用于人体，产品在运输、使用过程中对接触者和环境没有安全隐患。但是建议客户仍视为有潜在风险。
【标识的解释】
储存条件2~8℃
