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上海极威生物科技有限公司
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保质期:六个月
品牌:国内外ELISA试剂盒品牌
运输:包邮(中国大陆)
犬游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒包装形式:盒装(液体盒装)
ELISA实验操作步骤的一般常见方法
方法一)用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
犬游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒,英文名: Dog free fatty acids,FFA ELISA kit
国内统一规格:48T/96T
保质期:六个月
品牌:国内外ELISA试剂盒品牌
运输:包邮(中国大陆)
犬游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒包装形式:盒装(液体盒装)
ELISA实验操作步骤的一般常见方法
方法一)用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
1)包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
2)加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3)加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4)加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5)终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6)结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
方法二)用于检测未知抗体的间接法:
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,zui后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
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