上海雅吉生物科技有限公司

微量免疫电泳实验步骤

时间:2016-2-15阅读:751
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1. 琼脂板的铺制

 

如下图铺好琼脂板,然后按下图打孔划槽,电泳时不要把槽中的琼脂挑出来(槽的两纵向平行边先不划开)。

 

2.  加样

 

使琼脂板的上孔里充满抗原溶液,下孔里充满着指示蛋白。

 

3. 电泳

 

同上操作方法,调电流强度为2~4 mA/cm。当指示蛋白质到达滤纸的边缘时就可以停止电泳。一般需要40~60 min。

 

4. 扩散 

 

电泳结束后,从琼脂板中间的槽里用牙签挑出琼脂凝胶,并加入免疫血清。将琼脂板置温盒内(或培养皿中),盖好盖子放置一夜。次日可以观察到凝胶内出现的沉淀线。一般情况下每一沉淀线即代表一种抗原成分。根据沉淀的数量、位置可以判断抗原的纯度以及抗原蛋白质的种类。微量免疫电泳常用于分析样品的血清成分。

 

5. 观察 

 

免疫电泳的图谱可以直接观察到抗原抗体沉淀线,也可以用0.1%的氨基黑染色后观察。如果需要保存可以拍照。

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