酵母菌基因组DNA的提取

酵母菌基因组DNA的提取

一：仪器：同方法一 二：试剂：SE缓冲液（1M*，0.1MEDTA pH7.5）；*（50mg/ml）；20％PVP；蛋白酶K缓冲液（10mM Tris pH7.6 0.5% SDS 1mM EDTA）；其余同前三：操作  1.5ml  对数生长期细菌细胞         离心，12000rpm,1-2min       沉淀         溶于590ulSE缓冲液中混匀+10ul*37℃,1hr             离心，12000rpm,8-10min           沉淀溶于100μL，0.5μl蛋白酶Ｋ，混匀，37℃,1hr              加入1.2ml的CTAB/NaCL,200μl20%PVP 混匀  65℃,30min等体积酚//异戊醇混合液,混匀,离心,12000rpm,4-5min          上清,上清液 
2V无水乙醇、1/10VnaAC, 
-20,2或-80℃，30min 
                                 10000RPM,10min 
沉 淀  
70%冷乙醇洗涤 
真空干燥 干粉-20℃保存， 
或复溶于0.5-1mlTE或水中,分装成小体积, -20℃或4℃保存 
 
四：鉴定  
所提DNA进行Agarose胶分析（电泳过程见附），紫外观测仪观测，凝胶成像系统拍摄。