[测定方法] ELISA法
[方法学原理] 在微孔板上预包被纯化的柯萨奇病毒抗原，样本中的CXVAb-IgG可与微孔板上抗原结合，加入酶标抗体后，与抗原抗体复合物结合，在显色剂作用下显色，颜色的深浅与样本中抗体含量呈正相关。
[标本准备] 静脉抽血2ml，不抗凝。
[试剂]
1．微孔板
2．样品稀释液
3．酶联试剂
4．阴性对照
5．阳性对照
6．洗涤剂
7．TMB显色液
8．终止液
[仪器设备] 酶标仪或全自动酶联免疫检测仪。
[测定步骤]
1．取标本稀释液100yl，加入反应孔内（阴性对照、阳性对照直接加入100ul对照血清），待检血清各取10ul加入反应孔内，置37℃环境中反应20min。
2．用洗板机洗涤5次，拍干。
3．每孔加入100tA酶结合物，置37℃环境中反应20min。
4．洗板5次，拍干。
5．将底物A、B各50u1加入反应孔内，置避光显色lOmin。
6．每孔加入终止液50rtl，混匀终止反应。
7．空白对照孔调零，用450nm波长检测各孔 OD值，取临界值（cut off）＝0．10+阴性对照平均OD值（阴性对照<0．05按o．05计算）。检测标本OD值<临界值时，检测结果为阴性；标本检测值≥临界值时，检测结果为阳性。
[正常参考值] CXVAb-IgG阴性
[注意事项]
1．使用前试剂盒应预先在室温环境中平衡30min。
2．试剂盒在2～8C避光保存，启用后应尽快用完。
3．不同批次的试剂组分不能混用。
4．实验后试剂、血清标本均应视为有传染性物质。
5．用滴瓶滴加时，滴瓶应垂直，用力和速度应均匀，加样后充分混匀。
[临床意义] 柯萨奇病毒特异性抗体IgM出现早，消失也快，该抗体阳性提示现症感染，有早期诊断价值。柯萨奇病毒特异性IgG为中和抗体，阳性提示既往感染，但检测患者急性期及恢复期双份血清抗体效价升高4倍有诊断意义。
