载体两性电解质的理化性质 载体两性电解质（carrier ampholyte）是一种脂肪族多胺基多羧基的混合物（其商品名为Ampholine）。它的pK和pI值各自相异却又相近，即它是由异构物和同系物组成。
（一）缓冲性能强
Ampholine溶液在一定pH值范围内有充分的缓冲能力，当蛋白质分子进入与其等电点相应的pH值区域时，pH值并无变化。
（二）导电性能好
Ampholine溶液有均衡的电场强度，但是在pH值等于中性的区域导电性能较差。因此在应用时，不管选择什么pH值范围，一般都要加入占其总量1／10的pH值为6～8的Ampholine溶液，以保持电场强度的均匀性。
（三）分子质量小
Ampholine一般分子质量都在0．3～1kDa之间。这对利用层析法（如葡萄糖G—25凝胶过滤）把它和蛋白质分开是方便的。
（四）紫外吸收值低
Ampholine对于在280nm处测定蛋白质吸收值干扰小。但是，如果蛋白质浓度低，Ampholine用量又高，则往往有干扰，操作时应进行校正。
（五）一般与样品不起化学反应
载体两性电解质的pH值范围与用量选择 两性电解质的pH值范围选择得当，分辨率可提高。在测定未知样品的等电点时，可先采用pH值为3—10的两性电解质摸索，待初步测出等电点后，再改用包括样品pI值、pH值范围窄的两性电解质。
两性电解质一般都为40％的水溶液，电聚焦的用量通常为1％一2％。实验表明，两性电解质用量小时，电聚焦后形成的pH值梯度较其本身的pH梯度宽；相反，用量大时，电聚焦后形成的pH梯度与其本身的pH梯度近似。此外，电聚焦的时间直接影响pH梯度的变化，时间过长或过短都不会产生平滑的曲线，所以电聚焦时间应严格控制，才能得到分辨率高的电泳图谱，一般电泳时间以6—7h为宜。此外，聚丙烯酰胺的纯度也会影响pH梯度。
