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上海源叶生物科技有限公司
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阅读:375发布时间:2011-1-8
化学发光标记免疫测定(chemilumines centimmunoassay,CLIA),是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的一类免疫测定方法。用作标记的化学发光剂应符合以下4个条件:
①能参与化学发光反应;
②与抗原或抗体耦联后能形成稳定的结合物试剂;
③耦联后仍保留高的量子效应和反应动力;
④反应不改变或极少改变被标记物的理化特性,特别是免疫反应性。
鲁米诺类和吖啶酯类均是常用的标记发光剂。鲁米诺类的发光反应须有催化剂催化,且与蛋白质或肽结合后其发光作用减弱,因此鲁米诺类在CLEIA中不是很好的标记物,现已较少用于CLIA中。而吖啶酯类对CLIA更为适用,其显著的优点是:①氧化反应不需催化剂,只要碱性环境中就可以进行,发光反应迅速,本底低。②在氧化反应过程中,结合物被分解,因此游离吖啶酯的发光不受抑制,试剂稳定性好。其具体原理是将标记有吖啶酯的抗原(或抗体)与待测样本中的抗体(或抗原)反应后,加入H202溶液,后者与吖啶酯发生氧化反应,使吖啶酯放出光子,而光子的强度则与被测物的浓度成正比,因此测定反应产物的发光强度即得到被测物的浓度。
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