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弓形虫病诊断免疫学方法

阅读:713发布时间:2011-2-26

免疫学方法是目前该病的常用重要实验诊断方法。如方法应用得当,结果判断准确,能达到较好的辅助诊断目的。急性期以检出特异性IgM抗体或循环抗原为可靠指标,也可观察特异性IgG抗体的动态变化,慢性期则以检测IgG抗体为主。弓形虫病的血清学诊断方法有间接血凝试验、间接荧光抗体试验、染料试验、皮内变态反应和琼脂扩散试验等。染色试验是敏感可靠的方法,主要用于早期诊断。间接血凝试验用做流行病学调查。变态反应多用于人的检查和兽医检查猪。国内应用较为广泛的是间接血凝试验。

染色试验(DT) 为弓形虫病经典而*的血清学诊断方法。其原理为;在含有辅助因子(补体)的新鲜血清参与下,待测血清中特异性抗体使虫体细胞变性而不为美蓝着色。镜检见半数以上虫体不着色者为阳性,半数以上虫体着色者为阴性。该法必须用活速殖子为抗原,含辅助因子的正常血清须经筛选获得,由于筛选辅助因子较困难而使应用受到一定限制。吕元聪等(1994)以弓形虫碎片为抗原,建立的免疫酶染色试验(1EST)与DT的检测结果在已知和未知血清标本中差异无显著性(P>0.05)。该法操作简便,不需特殊设备,便于基层推广应用。Dando等(2001)用表达p:—半乳糖苷酶的转基因弓形虫速殖子的补体介导的溶解试验检测患者血清的弓形虫特异性抗体,比Sabin-Feldman染色试验简便、有效。

皮下试验(1CT) Netrebko(2003)用ICT检测了5472例确诊为弓形虫病患者的免疫力,阳性率54.28%,认为ICT方法简便、经济。

间接血凝试验(1HA) 由于该法简便、快速,具有良好的特异性与敏感性,加之商品试剂易获得,故被广泛使用。本法所测抗体在感染后出现较晚,较适宜用于隐性感染及血清流行病学调查。但该法重复性欠佳,偶因非特异性凝集出现假阳性反应。

间接荧光抗体试验(1FA) 以荧光标记第二抗体,用完整的速殖子作抗原,检测待检血清中的IgM或IgG抗体。此法具有高度的特异性、敏感性与稳定性,简便快速:由于所测抗体多为虫体表膜抗原诱导的特异性抗体,因此具有早期诊断价值。血清中有类风湿因子或抗核抗体时可出现假阳性反应。

 


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