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血清中和试验(SN) 检测猪繁殖与呼吸综合征

阅读:801发布时间:2011-4-2

一般来说,在群体水平上血清学诊断易操作,特异性强,敏感性高。但对个体的检测则比较困难,有时出现非特异性反应,但可以在2~3周后取样复测解决此问题。血清学检测一般用吸附试验(如IPMA、IF、ELISA),这些试验常用某种抗原型的病毒进行,对其他抗原异型病毒抗体的灵敏度较低。应用抗体结合试验,在病猪感染了7~14天检出抗病毒抗体,30~50天抗体滴度出现高峰。有些在病猪感染后3~6个月内血清转为阴性,有些病猪血清阳性维持较久。中和抗体在病猪感染后出现较慢,但滴度不高。可在感染后3-4周检测到中和抗体,这种抗体能维持1年或更长时间。有报道,在血清中和试验中使用补体能提高试验的灵敏度。关于病猪感染后血清阳性持续时间的长短,目前尚未进行广泛深入的研究,因其有可能随试验方法不同而异。母源抗体半衰期为12一14天,一般仔猪在出生后4~8周内可检测到病毒,随母猪生产时的滴度及所用试验方法而异。在污染的环境中,血清学检测为阳性的母猪所产仔猪能在3~6周龄时血清转为阳性。应用巨噬细胞分离病毒以及利用两类血清型病毒的IPMA在实验室容易操作,这种试验可用MARC-145细胞系增殖欧洲型病毒和美洲型病毒操作。使用MARC-145细胞系做间接免疫荧光试验(1FA)能顺利进行PRRSV血清学反应。目前,灵敏度高、特异性强商品化的ELISA试剂盒已经上市。同时,国内学者还开发了乳胶凝集试剂盒,可用于PRRSV抗体快速监测。

血清中和试验(SN) 血清中和试验检测PRRS抗体虽然特异性好,但PRRS的SN抗体比IFA抗体在血清中出现得晚,一般在感染后的4~6周才出现中和抗体,因此SN不适宜进行早期诊断。Christianson等(1992)报道SN的敏感性比IFA低,Yoon等(1994)对常规SN进行改良,在试验中加入20%豚鼠血清以增加补体的含量,从而提高SN的敏感性,在感染后的9-11天即可检测到较高滴度的SN抗体。SN抗体比IFA抗体存留的时间长,可维持半年以上。但由于对急性感染的敏感性较差,要求血清无污染,而且细胞培养工作量大,技术性强,目前于实验室研究应用。

 


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