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新城疫病毒强化试验(END)病毒分离与增毒试验诊断猪瘟

阅读:9444发布时间:2011-4-13

新城疫病毒强化试验

CSFV感染猪辜丸细胞后,不能使细胞发生CPE(细胞致病变效应)变化,但将鸡新城疫病毒接种于该感染细胞,则该细胞发生CPE变化。

根据CSFV的这一特性可以对CSFV进行检测和诊断,即称为鸡新城疫病毒强化试验(exalation of NDV,END)。此方法的不足之处是直接将被检病料处理后接种于细胞培养物,敏感性较低。若改用两步法,即先将被检病料处理后接种于猪脾细胞培养物,传代适应之后,再做END试验,则可明显提高其敏感性,但这样检测所需时间较长。该方法适用于检测那些易在猪源细胞中生长的野毒,对大部分兔化弱毒株无效,其原因是有些病毒往往不能在猪辜丸细胞内充分繁殖。优点:该方法具有较高的敏感性和重复性。缺点:特异性差,有些弱毒株能引起END现象,且易散毒。

病毒分离与增毒试验

CSFV能在猪肾细胞和其他一些哺乳动物细胞内增殖,敏感性zui强的细胞系是PK-巧、PK-2a和ST等几株猪肾和猪睾丸细胞系。

猪瘟病毒CSFV的分离一般采取病死猪的脾或淋巴结等含毒较高的组织,经研磨后用0.45rmi滤膜过滤,将滤液中病毒接种于敏感细胞进行分离,在接种病毒1天、2天、3天后进行免疫酶染色或免疫荧光染色、镜检。病毒分离鉴定方法具有准确的优点,但此法费时费力,且CSFV在传代过程中易发生变异,不利于对病毒核酸序列的分析。

 


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