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技术文章

肉毒梭菌分离培养的培养基

阅读:1048发布时间:2011-4-21

(1)肝块肉汤 牛肉膏20g,酵母浸膏48,蛋白胨48,*38,可溶淀粉18,蒸馏水1000ml。煮沸溶解,调pH8.0,过滤分装试管。另将牛肝煮熟切成约3~4mm见方小块,每一试管放入3~5个小块。121℃灭菌20-30min。

(2)TPGYT肉汤 胰蛋白胨(*)50g,Bacto胨58,酵母浸膏20g,葡萄糖4S,硫乙醇酸钠1e,蒸馏水1000ml。将所有成分溶解于水,调pH7.2。以15ml的量分装采样试管或以100mi的量分装三角烧瓶内,121℃高压15min。冰箱贮藏应于2周内用完。临用前应先将培养基隔水浴煮沸10一15min驱氧,迅速冷却,再加入过滤除菌的1.5%*(1:250)水溶液lml。加酶后更不可贮存,应及早用去。

(3)M.W.D.Wren改良厌氧菌培养基 脱水肉粒1.58,置有螺盖的试管中,加入18ml布氏肉汤复合物(Difo布氏肉汤30g,酵母浸膏5g,胰胨1g,蒸馏水1000m1)再加入氯化血红素质(haemin)5ug/m1,* 1ul/m1。121~C高压灭菌15rain后,再加入2ml碳水化合物混合液(葡萄糖7g,纤维二糖1g,麦芽糖1g,可溶淀粉1g,蒸馏水100mi,过滤,灭菌)。在沸水浴中处理30min,冷凉后可接种检样,37℃培养18h观察。

(4)D-环*-血晾脂 牛肉膏4s,Witt蛋白胨2s,蛋白胨28,酵母浸膏2g,葡萄糖lS(可不用),氯化钠2Z,*2S,琼脂15g,明胶5s,蒸馏水1000ml。沸至全溶,调pH7.6。121℃灭菌20min。冷却到50~C时,加人50ml无菌脱纤牛血和D-环*重酒石酸盐(使其终浓度为400gg/m1)。混匀,倾注平板。经37℃无菌检验后,贮于4~C冰箱备用。

(5)肝-犊肉-蛋黄琼脂 肝浸汤50g,犊肉浸汤50g,蛋白胨20g,新胨1.3e,胰胨1.3g,等电性酪蛋白28,葡萄糖5s,可溶淀粉10g,氯化钠5g,硝酸钠28,明胶2z,琼脂15g,蒸馏水1000ml。加热溶解,调pH7.2~7.4。121~C高压灭菌15min。凉到50~C时,加入1 21卵黄液40mi混合均匀,倾注平板,4℃冰箱保存备用。

(6)肉毒梭菌鉴别培养基 胰酪胨(BBL)40g,氯化钠4s,酵母浸膏58,琼脂13g,蒸馏水1000ml,pH7.6。高压灭菌后立即加入D-葡萄糖10g,摇匀,冷却到50℃时,加入滤过灭菌的*76ug/m1,*氧卡嘧啶4Ug/mL(作为选择抑制剂)。临用时加入不同水平的肉毒梭菌的抗毒素(0.51U/ml、1.01U/ml、1.51U/m1及2.0IU/mi):倾注于5ml的小平板中。
 


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