1。定义 在真核细胞中绝大多数的mRNA前体在离开细胞核之前转变成成熟的mRNA，此加工过程是在被称为拼接体的核糖核酸蛋白复合物中进行的。其主要成分是小核糖核蛋白（snRNPs）和大量的附加蛋白质因子。SnRNPs的结构和功能已经很明确，但对hnRNPs了解不多。RNase处理核抽提物，经蔗糖梯度离心在、40S处可得到一些颗粒成分。在这些颗粒成分中除了mRNA前体片段外，包含了大约30种不同的能被hnRNPC蛋白单克隆抗体识别的蛋白。因此，所有能被hnRNP单抗沉淀的蛋白质被命名为hnRNP蛋白。根据它们分子量和双向电泳中的迁移为特征用字母序号命名为hnRNP-A1（34kD）到hnRNP-U（120kD），其中hnRNP A和B（hnRNPA／B）蛋白推测可能是从同一基因编码得来的一组高度相关蛋白质。
2．天然抗原与重组抗原的特性 A1抗原是*个克隆并在细菌中表达的hnRNP蛋白。大多数有关这一蛋白结构、功能和抗原性的资料是从重组体中得到的。虽然有关hnRNPA2重组蛋白的资料很少，但有很好的迹象表明重组蛋白的表现与其天然产物在本质上没有多大区别。
3．起源和细胞定位 hnRNP蛋白在进化过程中是非常保守的蛋白，似乎存在于所有的脊椎动物的细胞和组织中，果蝇细胞中也存在几种与脊椎动物hnRNPA／B相似的蛋白。hnRNP蛋白主要是定位于富含蛋白的细胞核中。其功能为包装和加工RNA前体。有证据表明hnRNP A／B蛋白在剪接中起重要的调节作用。此外，这些蛋白可在核与胞浆间穿梭，推测可能与mRNA的转运有关。
4．纯化的方法 hnRNP蛋白zui初由HeLa细胞分离得到，但其他快速生长的细胞（人类）株（例如MOLT-4 orJurkat）也是很好的来源。采用肝素—琼脂糖亲和层析一步法可简单、快速获得半纯化的hnRNP A／B。简要地说，核抽提物在20 mmol／LHepes，0．3mmol／L NaCl pH 7．9的肝素琼脂糖凝胶层析介质结合，先用缓冲液洗柱，然后用20mmol／L Hepes，lmmol／L NaCl pH7．9洗柱，zui后用含6mmol／L尿素的同样的缓冲液洗脱。尿素洗脱液内含约为20倍浓集的hnRNP蛋白。该方法纯化的hnRNP蛋白主要是两种hnRNP-A，hnRNP-B含量较少。随后采用弱阳离子交换介质CM-琼脂糖凝胶进行离子交换层析，可获得高纯度的hnRNP-A2。然而，这种纯化的蛋白在水样的缓冲液中几乎是不溶的，溶解它要加入6mmol／L的脲或1％SDS。hnRNP-A1的纯化是用苯琼脂糖疏水交换层析。作为选择，也可用单链DNA亲和层析或密度梯度离心。然而对大规模的纯化不推荐后一种方法。
5．序列信息 hnRNP-A1和hnRNP—A2的分子量分别为34kD和36kD。两者都是碱性蛋白质，其等电点分别为8．4和9．0，在体内以部分磷酸化的形式存在。两种蛋白高度相关并且N末端氨基酸有80％以上相同。它们含有两个保守的RNA结合区域（RBD），也叫做RNA识别序列（RRM），在C—末端接着一个富含*的片段。hnRNP-B1与hnRNP-A2除了前者在N末端剪切插人了一个12氨基酸的片段以外，其他*一致。有关hnRNP-B2的结构目前仍不知。由于抗hnRNP-A2／RA33抗体与两种hnRNPB蛋白存在广泛的交叉反
应，因而推测hnRNP-B2可能是mRNA前体在成熟过程中剪切产生。此外有报道hnRNP-A1的一段剪切变体（hnRNP-Alb）仅仅是在C末端有50个氨基酸的插入顺序，编码hnRNP-A1和hnRNP-A2的基因有相似的结构等等均说明可能是来自于同源基因。
到目前为止，有关hnRNP A／B蛋白资料表明，主要的抗原表位定位于N末端，此类区域含有两个RBD区域。
所有的hnRNPA／B蛋白的特点是都具有同样的分子结构：N—末端含有两个毗邻的保守的RNA结合域（RBD），与大多数RNA结合域一样大约为80个氨基酸组成。黑色条带代表了每条RBD的两个zui保守的序列。C—末端叫辅助域，含有约50％的*残基并与其他富含*（如胶原蛋白、角蛋白或EBNA—1）酌结构相一致。hnRNP-B1蛋白除了接近N末端的由选择性剪切产生的12个氨基酸的插入片段以外其他与hnRNP-A1*一致。hnRNP-B2的基本结构还不知，但可以假设是hnRNP-A2另一个选择性剪切结构。hnRNP-A1与hnRNP-A2 N—末端中有80％以上的序列相似，富含*区域处大约有40％的序列相似。选择性的剪切变体hnRNP-Alb，在其富含*的辅助区有50个氨基酸插入片段。自身抗体的反应似乎是直接针对抗原的N—末端。hnRNP-A2的含有完整的RBD H结构，携带很多抗原信息的抗原决定簇结构zui近已获得鉴定。
