行业产品

  • 行业产品

上海源叶生物科技有限公司


当前位置:上海源叶生物科技有限公司>公司动态>质体DNA 酵解反应与洋菜胶体电泳分析
公司动态

质体DNA 酵解反应与洋菜胶体电泳分析

阅读:716发布时间:2010-7-7

本实验以BamHI 与HindIII 酵解pBlueGus,并以洋菜电泳分析产物。
仪器用具:微?离心机;37℃恒温水槽;Mupid II 迷你电泳槽及铸胶器;UV transilluminator;防护面罩;拍?得相机
药品试剂:
质体pBlueGus DNA ;限制酶BamHI 与HindIII (Roche);10×Reaction buffer 2 (Roche);10×Reaction buffer 3 (Roche);Agarose;1×TAE 电泳缓冲液;DNA分子?标记 (??DNA/HindIII 或100 bp ladder, 0.5 μg/mL);10×追踪染剂 (0.25% bromophenol blue; 0.25% xylene cyanol; 0.1 M EDTA;50% glycerol);Ethidium bromide (500 μg/mL);拍?得667 底片
方法步骤:
1) 取两支1.5 mL微?离心管,分别标示为 #1 与 #2 的后,依下表所?顺序,
逐一加入酵解反应所需各项物质 (体积单位为 μL)。注意:应等所有成份?加?的后,再加入限制酶。

2) 以手指头轻弹微?离心管,以?均匀混合管中各项物质。
3) 离心数秒后,放置于37℃恒温水槽作用1~2 h。
4) 请?用这一段时间参照『基本操作技术』所描述的步骤准备一片1.2%洋菜胶体。
?? Ethidium bromide 是强?致癌物质,严禁戴着手套到处?摸!
5) 自恒温水槽取出微?离心管,离心数秒后暂存冰中备用。
6) 拟进?电泳分析时,请拿出3 支1.5 mL 微?离心管,分别标示为 #1, #2与 #3,并依下表所示在各离心管逐一加入适?的DNA 与10×追踪染剂(体积单位为 μL)。

7) 把胶片移至电泳槽,注入适?电泳缓冲液,以微?移液器P20 逐一将样本
吸入注出数次使混合均匀,并小心注入胶片的样本槽中。
8) 接好电极线以定电压100 V 进?电泳,待追踪染剂移动至胶体三分的二处时,关闭电源,将胶体移至UV transilluminator box,以拍?得相机拍照 。
?? DNA泳动方向为 (-) 向 (+)。 此外,在UV transilluminator box上直接观察DNA色带时,没戴眼镜的同学应戴上护目镜或面罩,以避免UV灼伤;含有ethidium bromide的洋菜胶体请丢至容器中!

 


环保在线 设计制作,未经允许翻录必究 .      Copyright(C) 2021 https://www.hbzhan.com,All rights reserved.

以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,环保在线对此不承担任何保证责任。 温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。

会员登录

×

请输入账号

请输入密码

=

请输验证码

收藏该商铺

登录 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我们将在第一时间回复您~