[器材和试剂]
● 直径为60mm的聚苯乙烯培养皿（Falcon 1007）
● 包被缓冲液
● 单克隆抗体（mAb）57D1。该抗体能识别M13噬菌体次要衣壳蛋白（pⅢ）N末端。它是用M13噬菌体颗粒免疫大鼠而获得的。来自含57D1杂交瘤细胞的上清用50％（NH4）2SO4沉淀，然后在PBS中溶解并透析，zui后抗体在蛋白G—Sepharose上免疫纯化。
● PBST
● 封闭液
● PEG—纯化的噬菌体
● 细菌提取物
● PEG—纯化的nRl噬菌体
● *—HCl/BSA（100mmol/L*， 用HCl调至pH 2．7， 10ug/ml BSA）
● 2mol/L Tris—HCl，pH 9．4（新鲜溶液）
[方法]
1．将4m1包被缓冲液稀释的PEG纯化噬菌体（约1×1011TU/ml）等量分加在聚苯乙烯培养皿中。4℃在摇床上摇动过夜。
2．弃去上清并在室温下用PBST充分冲洗。
3．加6ml封闭液并在37℃摇床上摇动孵育1小时。
4．在总体积为4ml的封闭液中，将40ul血清与100/xl细菌提取物和4×1012pfu经PEG纯化的nRl载体噬菌体混合，并在室温下孵育60分钟。
5．弃去封闭液。用PBST快速洗涤。将预孵育的混合物加到平板上。4℃在摇床上摇动过夜孵育。
6．弃去溶液并在室温下用PBST充分洗板。
7．除去洗涤缓冲液。加4ml*—HCl/BSA洗脱。室温下摇床孵育10分钟。在含有-100ul 2mol/LTris—HCl pH 9．4的聚丙烯管内进行中和。
8．采用ELISA模式，用纯化抗体来检测噬菌体—多肽或抗原。
