如果噬菌体筛选的过程在微孔板中进行，靶标蛋白固定的基本条件也就建立起来了。通过预先包被亲和素（avidin）或者抗标签的抗体之类的试剂，把靶标蛋白间接地固定到包被过的微孔板上，这样固定方法对于噬菌粒结合性检测是有益的。尽管如此，由于噬菌粒结合性检测中使用溶液相的靶标作为结合的竞争剂来生成结合性曲线，所以不应该通过使用抗靶标的抗体来进行固定。下面我们给出一个把靶标蛋白直接固定到微孔板上的典型实验方案。
靶标包被的微孔板的准备
[器材和试剂]
● 9孔板（Nunc Maxisorp）
● 50mmol/L的碳酸钠缓冲液，pH 9．4
● 醋酸酯平板盖（Acetateplatesealer；Dynex）
● PBST：含0．05％Tween-20（体积分数）的磷酸盐缓冲液，pH 7．4
● CBB：酪蛋白封闭缓冲液（Pierce）
● 8通道P200型多通道移液枪
● 自动洗板仪（Skatron或类似产品）
[方法]
1．将溶于碳酸钠溶液（预先确定的浓度见实验方案5．2）的靶标蛋白加入96孔板的底部， 每孔100u1。在无靶标的对照孔中，只加入lOOul碳酸钠溶液。
2．微孔板盖好，小心地将微孔板放入4℃冰箱中，不要扰动包被液，孵育过夜。
3．将微孔板内溶液甩出，然后将微孔板倒扣在吸水纸上，吸干残留液体。
4．在所有孔中马上加入CBB（不加去垢剂）进行封闭，每孔230ul，在室温下反应30 分钟。
5．在将要使用微孔板时，吸去微孔板内溶液，用PBST将微孔板洗涤三次。
在进行噬菌体结合性检测前，用来包被的靶标蛋白的浓度，以及在竞争性结合实验中加入的噬菌体的浓度，都必须事*行测定。两个过程zui初都可以利用保存的野生型噬菌体，在一个二维方格（two—dimensional grid）中同时进行。
