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技术文章
γ-干扰素IFN-γ的诱生
点击次数:458 发布时间:2010-11-23
IFN-γ的诱生剂包括多种有丝分裂原,例如植物血凝素(PHA)、美洲商陆(PWM)、ConA、SPA、葡萄球菌肠毒素A和B(SEA和SEB)以及抗淋巴细胞血清(AIS)和抗人T细胞CD3 McAb等。
1.常规方法分离人外周血单个核细胞。
2.用含5%正常人血清(或10%新生小牛血清)、10mmol/LHEPES、2mmol/L*、100U/mL*、pH7.2~7.4的1640液调整细胞浓度为5×106—10×106/mL。
3.加PHA 50—100tzg/mL(或PWM 5~10ug/mL、ConA 10—20itZ/mL,均为终浓度),37℃培养48-72h。