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肉毒梭菌分离培养的培养基
点击次数：573 发布时间：2011-1-6
（1）肝块肉汤 牛肉膏20g，酵母浸膏48，蛋白胨48，*38，可溶淀粉18，蒸馏水1000ml。煮沸溶解，调pH8.0，过滤分装试管。另将牛肝煮熟切成约3～4mm见方小块，每一试管放入3～5个小块。121℃灭菌20-30min。
（2）TPGYT肉汤 胰蛋白胨（*）50g，Bacto胨58，酵母浸膏20g，葡萄糖4S，硫乙醇酸钠1e，蒸馏水1000ml。将所有成分溶解于水，调pH7．2。以15ml的量分装采样试管或以100mi的量分装三角烧瓶内，121℃高压15min。冰箱贮藏应于2周内用完。临用前应先将培养基隔水浴煮沸10一15min驱氧，迅速冷却，再加入过滤除菌的1．5％*（1：250）水溶液lml。加酶后更不可贮存，应及早用去。
（3）M．W．D．Wren改良厌氧菌培养基 脱水肉粒1．58，置有螺盖的试管中，加入18ml布氏肉汤复合物（Difo布氏肉汤30g，酵母浸膏5g，胰胨1g，蒸馏水1000m1）再加入氯化血红素质（haemin）5ug／m1，* 1ul／m1。121~C高压灭菌15rain后，再加入2ml碳水化合物混合液（葡萄糖7g，纤维二糖1g，麦芽糖1g，可溶淀粉1g，蒸馏水100mi，过滤，灭菌）。在沸水浴中处理30min，冷凉后可接种检样，37℃培养18h观察。
（4）D-环*-血晾脂 牛肉膏4s，Witt蛋白胨2s，蛋白胨28，酵母浸膏2g，葡萄糖lS（可不用），氯化钠2Z，*2S，琼脂15g，明胶5s，蒸馏水1000ml。沸至全溶，调pH7．6。121℃灭菌20min。冷却到50~C时，加人50ml无菌脱纤牛血和D-环*重酒石酸盐（使其终浓度为400gg／m1）。混匀，倾注平板。经37℃无菌检验后，贮于4~C冰箱备用。
（5）肝-犊肉-蛋黄琼脂 肝浸汤50g，犊肉浸汤50g，蛋白胨20g，新胨1．3e，胰胨1．3g，等电性酪蛋白28，葡萄糖5s，可溶淀粉10g，氯化钠5g，硝酸钠28，明胶2z，琼脂15g，蒸馏水1000ml。加热溶解，调pH7．2～7．4。121~C高压灭菌15min。凉到50~C时，加入1 21卵黄液40mi混合均匀，倾注平板，4℃冰箱保存备用。
（6）肉毒梭菌鉴别培养基 胰酪胨（BBL）40g，氯化钠4s，酵母浸膏58，琼脂13g，蒸馏水1000ml，pH7．6。高压灭菌后立即加入D-葡萄糖10g，摇匀，冷却到50℃时，加入滤过灭菌的*76ug／m1，*氧卡嘧啶4Ug／mL（作为选择抑制剂）。临用时加入不同水平的肉毒梭菌的抗毒素（0.51U／ml、1.01U／ml、1.51U／m1及2.0IU／mi）：倾注于5ml的小平板中。