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甲状腺过氧化物酶自身抗原
点击次数：436 发布时间：2011-1-20
1．定义及特性 人甲状腺过氧化物酶（Thyroidperoxidase，TPO）由933个氨基酸残基组成，分子量为84—105kD，是一种含一个亚铁原卟啉辅基的膜相关糖蛋白。TPO仅在甲状腺细胞内表达，且主要存在于细胞顶端，蛋白质的羧基末端包含一个跨膜区。
少量的TPO可从人甲状腺组织中获得，从其他动物（包括猪）获得的TPO不被人TPO抗体识别。因此，重组人TPO是替代人甲状腺组织作为抗原的首要来源，尽管重组TPO能在原核细胞、酵母、昆虫细胞中表达，也可利用不同的质粒或病毒载体在各种哺乳细胞中表达，但惟有核细胞（中国大田鼠卵巢细胞，CHO）或昆虫细胞表达的TPO具有人TPO抗体所识别构型表位。
甲状腺过氧化物酶：自身抗原和自身抗体
自身抗原
特性 933氨基酸，105kD，糖蛋白亚铁原卟啉辅基
组织分布 甲状腺*，甲状腺细胞顶端表面
来源
天然 主要是甲状腺
重组 真核细胞（中国大田鼠卵巢细胞或杆状病毒）
自身抗体
分型 主要为IgA，1gGl>IgG2>IgG4>>IgG3 ：
轻链型 κ>λ
亲和力 高（一10-10Mkd）
检测 ELISA，125I-TPO沉淀法，鼠单克隆抗TPO固相竞争法，TPO化学发光法检测
表位
构象 存在于所有个体
线性 存在于部分个体
免疫优势区域 存在于所有个体，血清中>80％的自身抗体
人单克隆抗体 重组F（ab），IgGl和IgG4，x和L，高亲和力，表位构象
相关疾病 慢性淋巴细胞性甲状腺炎，毒性弥漫性甲状腺肿
预后 自身免疫性甲状腺功能减退，产后甲状腺功能障碍
人TPO包含933个氨基酸，自身抗体识别的两个TPO线性抗原决定簇，一个位于自身抗原免疫显性区域外（mAb 47／C21，713～721个氨基酸残基），因此仅代表所有自身抗体的一小部分。免疫决定区域内的构象复杂、且不连续，尚不能用肽或多肽检测技术测定。
2．纯化方法 采用去垢剂溶化和*消化甲状腺微粒等步骤，可从人甲状腺组织或转染、表达TPO的CHO细胞和昆虫细胞中抽提TPO。再用鼠抗人TPO的单克隆抗体亲和纯化，即可纯化TPO蛋白。